[發明專利]一種用于全集成微流控芯片的STR快速個體識別擴增試劑及其應用

有效

• 申請號: 202110526237.3
• 申請日: 2021-05-14
• 公開（公告）號: CN113106161B
• 公開（公告）日: 2023-03-17
• 發明（設計）人: 李彩霞;韓俊萍;葉健
• 申請（專利權）人: 公安部物證鑒定中心
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

本發明公開了一種用于全集成微流控芯片的STR快速個體識別擴增試劑及其應用。本發明基于國內首臺自主研發的全集成式DNA現場快速檢驗儀器Quick TargSeq構建了一套包含20個CODIS STR基因座和1個Amelogenin性別基因座的微流控芯片快速擴增試劑—RTyper 21，并采用凍干方式構建了RTyper21芯片凍干擴增試劑。通過實驗證明：該RTyper21芯片凍干擴增試劑可以在微流控芯片卡盒中長期儲存，可對口腔拭子、血卡、唾液卡樣本進行檢測，并在2個小時內完成樣本裂解、PCR擴增、電泳分離全部流程，滿足了公安實戰現場、快速檢測的迫切需要。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，具體涉及一種用于全集成微流控芯片的STR快速個體識別擴增試劑及其應用。

背景技術

利用PCR-STR分型技術能夠對犯罪現場生物物證進行個體識別，從而認定或者排除嫌疑人。常規STR分型過程包括DNA提取、PCR擴增、電泳分離和分型圖譜分析。整個檢測過程大致需要6～8小時，耗時長、步驟多、操作復雜，對操作人員專業技能要求較高，也容易出現樣本污染風險。目前一些重大、突發性案件常常需要短時間獲得檢驗結果，以為案件偵查提供方向。常規DNA分型檢驗方法已無法滿足公安實戰需求，亟需向著現場快速、集成便捷的方向實現革新。

微流控芯片技術是把生物、化學、醫學分析過程的樣品制備、反應、分離、檢測等基本操作單元集成到一塊微米尺度的芯片上，自動完成分析全過程。與傳統分析方法相比，具有體積小、樣品和試劑消耗少、易于實現操作流程自動化和全集成等諸多優勢。目前，許多學者基于微流控芯片技術，對快速DNA檢驗開展了諸多研究，例如微流控芯片PCR技術、微流控芯片電泳技術、集成式芯片技術等。在此基礎上，一系列DNA快速檢驗儀器也相繼研發生產并得到應用，與儀器配套使用的STR快速檢測試劑也是實現一體化快速檢測不可或缺的一部分。目前國外的幾款快檢儀主要有：200，配套使用16HS試劑盒，90min內可完成包含16個基因座的整個DNA檢驗流程；單通道的ID，配套使用Express試劑盒，90min內可完成24個基因座的分型；以及ANDE^TM6C，使用FlexPlex^TM27試劑盒，該試劑盒包含20個CODIS核心位點，90min內完成DNA檢驗的所有步驟。

發明內容

本發明的一個目的是提供用于檢測人基因組中21個基因座的引物對組；所述21個基因座分別為：D2S441、D5S818、D21S11、D16S539、D1S1656、TPOX、AMEL、D3S1358、D13S317、D7S820、D2S1338、D18S51、D19S433、D22S1045、D8S1179、vWA、TH01、D10S1248、D12S391、CSF1PO和FGA。

上述引物對組由如下(1)-(21)組成：

(1)用于檢測D2S441的引物對1，由序列表中序列1和序列2所示的兩條單鏈DNA組成；

(2)用于檢測D5S818的引物對2，由序列表中序列3和序列4所示的兩條單鏈DNA組成；

(3)用于檢測D21S11的引物對3，由序列表中序列5和序列6所示的兩條單鏈DNA組成；

(4)用于檢測D16S539的引物對4，由序列表中序列7和序列8所示的兩條單鏈DNA組成；

(5)用于檢測D1S1656的引物對5，由序列表中序列9和序列10所示的兩條單鏈DNA組成；

(6)用于檢測TPOX的引物對6，由序列表中序列11和序列12所示的兩條單鏈DNA組成；

(7)用于檢測AMEL的引物對7，由序列表中序列13和序列14所示的兩條單鏈DNA組成；

(8)用于檢測D3S1358的引物對8，由序列表中序列15和序列16所示的兩條單鏈DNA組成；