[發明專利]一種用于全集成微流控芯片的STR快速個體識別擴增試劑及其應用

有效

• 申請號: 202110526237.3
• 申請日: 2021-05-14
• 公開（公告）號: CN113106161B
• 公開（公告）日: 2023-03-17
• 發明（設計）人: 李彩霞;韓俊萍;葉健
• 申請（專利權）人: 公安部物證鑒定中心
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

1.用于檢測人基因組中21個基因座的成套系統，其包括全集成式DNA現場快速檢驗儀器Quick TargSeq和與其配套使用的凍干擴增試劑；所述凍干擴增試劑包括擴增預混液和引物混合液；

所述擴增預混液包括擴增所需的酶、原料和緩沖液；

所述引物混合液包括用于檢測人基因組中21個基因座的引物對組；所述21個基因座分別為：D2S441、D5S818、D21S11、D16S539、D1S1656、TPOX、AMEL、D3S1358、D13S317、D7S820、D2S1338、D18S51、D19S433、D22S1045、D8S1179、vWA、TH01、D10S1248、D12S391、CSF1PO和FGA；

所述凍干擴增試劑的制備方法包括如下步驟：

1)將含有海藻糖和葡聚糖的溶液作為凍干輔料與所述擴增預混液混勻，得到液體試劑甲；將甘露醇溶液和海藻糖溶液的混合液作為凍干輔料與所述引物混合液混勻，得到液體試劑乙；

所述含有海藻糖和葡聚糖的溶液由海藻糖、葡聚糖和水混勻得到，所述海藻糖在所述溶液中的質量分數為20％，所述葡聚糖在所述溶液中的質量分數為10％；所述含有海藻糖和葡聚糖的溶液與所述擴增預混液按照體積比為1：1的比例混勻；

所述甘露醇溶液和海藻糖溶液的混合液由質量分數為15％的甘露醇溶液與質量分數為15％的海藻糖溶液按照體積比為8：1的比例混勻得到；所述甘露醇溶液和海藻糖溶液的混合液與所述引物混合液按照體積比為1：1的比例混勻；

2)將所述液體試劑甲和所述液體試劑乙均進行冷凍干燥，分別得到凍干小球，即為凍干擴增試劑；所述冷凍干燥的程序如下：預凍：-55℃30min；升華干燥：-45℃240min，-35℃360min，-25℃240min；解析干燥：20℃360min；保溫：4℃；

所述引物對組由如下(1)-(21)組成：

(1)用于檢測D2S441的引物對1，由序列表中序列1和序列2所示的兩條單鏈DNA組成；

(2)用于檢測D5S818的引物對2，由序列表中序列3和序列4所示的兩條單鏈DNA組

成；

(3)用于檢測D21S11的引物對3，由序列表中序列5和序列6所示的兩條單鏈DNA組成；

(4)用于檢測D16S539的引物對4，由序列表中序列7和序列8所示的兩條單鏈DNA組成；

(5)用于檢測D1S1656的引物對5，由序列表中序列9和序列10所示的兩條單鏈DNA組成；

(6)用于檢測TPOX的引物對6，由序列表中序列11和序列12所示的兩條單鏈DNA組成；

(7)用于檢測AMEL的引物對7，由序列表中序列13和序列14所示的兩條單鏈DNA組成；

(8)用于檢測D3S1358的引物對8，由序列表中序列15和序列16所示的兩條單鏈DNA組成；

(9)用于檢測D13S317的引物對9，由序列表中序列17和序列18所示的兩條單鏈DNA組成；

(10)用于檢測D7S820的引物對10，由序列表中序列19和序列20所示的兩條單鏈DNA組成；

(11)用于檢測D2S1338的引物對11，由序列表中序列21和序列22所示的兩條單鏈DNA組成；

(12)用于檢測D18S51的引物對12，由序列表中序列23和序列24所示的兩條單鏈DNA組成；

(13)用于檢測D19S433的引物對13，由序列表中序列25和序列26所示的兩條單鏈DNA組成；

(14)用于檢測D22S1045的引物對14，由序列表中序列27和序列28所示的兩條單鏈DNA組成；

(15)用于檢測D8S1179的引物對15，由序列表中序列29和序列30所示的兩條單鏈DNA組成；

(16)用于檢測vWA的引物對16，由序列表中序列31和序列32所示的兩條單鏈DNA組成；

(17)用于檢測TH01的引物對17，由序列表中序列33和序列34所示的兩條單鏈DNA組成；

(18)用于檢測D10S1248的引物對18，由序列表中序列35和序列36所示的兩條單鏈DNA組成；

(19)用于檢測D12S391的引物對19，由序列表中序列37和序列38所示的兩條單鏈DNA組成；

(20)用于檢測CSF1PO的引物對20，由序列表中序列39和序列40所示的兩條單鏈DNA組成；

(21)用于檢測FGA的引物對21，由序列表中序列41和序列42所示的兩條單鏈DNA組成；

所述引物對組中，所述引物對1、所述引物對2、所述引物對3、所述引物對4、所述引物對5、所述引物對6、所述引物對7、所述引物對8、所述引物對9、所述引物對10、所述引物對11、所述引物對12、所述引物對13、所述引物對14、所述引物對15、所述引物對16、所述引物對17、所述引物對18、所述引物對19、所述引物對20、所述引物對21的摩爾比為0.44：0.48：1.31：0.99：1.57：8.41：0.45：0.43：0.64：1.15：1.44：2.53：1.55：0.49：1.71：1.04：2.15：0.8：0.78：0.68：0.87；每個引物對中兩條引物的摩爾比均為1：1。

2.權利要求1所述的成套系統在如下任一種中的應用：

(a)STR分型；

(b)個體識別。