[發明專利]基于熒光定量PCR技術的新冠病毒新型核酸突變檢測技術及其應用

在審

• 申請號: 202110508384.8
• 申請日: 2021-05-11
• 公開（公告）號: CN113025759A
• 公開（公告）日: 2021-06-25
• 發明（設計）人: 李萬帥;孔祥賓;湯麗麗
• 申請（專利權）人: 常州國藥醫學檢驗實驗室有限公司
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 常州市權航專利代理有限公司 32280
• 代理人: 黃晶晶

1.一種基于熒光定量PCR技術的新冠病毒新型核酸突變基因類型檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括以下兩組引物和探針，每個所述探針的兩端分別標記有熒光報告基團/熒光淬滅基團：

a.用于檢測S基因突變類型：序列位置23012，序列變化GC的引物和探針；其中所述引物包括核苷酸序列分別如SEQ ID No.1、SEQ ID No.2所示的多核苷酸，其中所述探針的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示；

b.用于檢測S基因突變類型：序列位置22917，序列變化TG的引物和探針；其中所述引物包括核苷酸序列分別如SEQ ID No.6、SEQ ID No.7所示的多核苷酸，其中所述探針的核苷酸序列如SEQ ID No.8所示。

2.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒中還含有用于檢測內參基因的引物和探針。

3.根據權利要求2所述的試劑盒，其特征在于，所述用于檢測內參基因的引物的核苷酸序列分別如SEQ ID No.9和SEQ ID No.10所示；用于檢測內參基因的所述探針的核苷酸序列如SEQ ID No.11所示，所述探針的兩端分別標記有熒光報告基團/熒光淬滅基團。

4.根據權利要求1或3所述的試劑盒，其特征在于，所述熒光報告基團/熒光淬滅基團選自FAM、VIC或HEX、ROX、NED、CY3或CY5熒光報告基團BHQ1、BHQ2、BHQ3、Dabcy1、Tamra和Quencher基團且試劑盒中各個所述探針上熒光報告基團互不相同。

5.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括以下組分中的任一種或幾種：PCR反應液、酶混合液、陽性對照、陰性對照。

6.根據權利要求5所述的試劑盒，其特征在于，所述PCR反應液包括緩沖液、MgCl2、dUTP和dNTPs；所述酶混合液包括Taq酶、反轉錄酶和UNG酶。

7.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述陽性對照選自以下以下任一中或幾種：含有部分新冠病毒的S基因序列的假病毒或含有新冠病毒突變序列的假病毒。

8.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述陰性對照為無菌水。

9.如權利要求1-8任一項所述試劑盒用于檢測以下任一種或兩種新冠病毒核酸S基因突變類型中的用途：a.S基因突變類型：序列位置23012，序列變化GC；b.S基因突變類型：序列位置22917，序列變化TG。

10.如權利要求1-8任一項所述試劑盒在制備檢測以下任一種或兩種新冠病毒核酸S基因突變類型的產品中的用途：a.S基因突變類型：序列位置23012，序列變化GC；b.S基因突變類型：序列位置22917，序列變化TG。