[發明專利]一種擬康氏木霉固態發酵的方法及其應用

有效

• 申請號: 202110507710.3
• 申請日: 2021-05-10
• 公開（公告）號: CN113151011B
• 公開（公告）日: 2023-06-06
• 發明（設計）人: 于存;呂俊;蔣仙;祝靜;雷嬌嬌
• 申請（專利權）人: 貴州大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C05G1/00;C05F17/20;C12R1/885
• 代理公司: 貴州聯德佳為知識產權代理事務所(普通合伙) 52123
• 代理人: 張梅

本發明公開了一種擬康氏木霉固態發酵的方法及其應用。本發明具體方法包括如下步驟：(1)擬康氏木霉液體菌種的制備；(2)固態發酵基質的制備；(3)擬康氏木霉固態發酵；本發明擬康氏木霉固態發酵物的應用，是將擬康氏木霉固態發酵的方法制得的擬康氏木霉固態發酵物用于提高黃豆生長，改善黃豆生理和土壤環境質量。由本發明生產的擬康氏木霉固態發酵，具有孢子含量高，生產成本低，環境友好，能耗低的特點，擬康氏木霉固態發酵物能夠有效提升黃豆的生長，改善苗生理和土壤環境質量。同時，高效利用了白酒生產廠的廢棄物酒糟，對當地的經濟與環境保護具有重要意義。

技術領域

本發明屬于微生物發酵技術領域，具體是一種擬康氏木霉固態發酵的方法及其應用。

背景技術

中國是白酒生產大國，酒文化及其歷史可追溯幾千年前，每年產生的白酒酒糟超過1億噸。目前，國內在對酒糟合理利用方面的研究已取得了一些進展，酒糟資源化利用范圍涵蓋了生物、醫藥、化工、農業和食品等多個方面。但是，釀酒廠所產酒糟數量較大，用于飼料、生化產品、食品等方面的酒糟僅占總數量的一部分。另外，由于其加工處理手段不完善，酒糟往往偷運亂倒、露天堆積、隨意填埋等現象隨處可見，既浪費了資源，又對生態環境造成了污染。因此，酒糟的綜合治理和再利用是白酒行業發展面臨的關鍵問題。酒糟中含有氨基酸、有機酸等大量營養物質。另外，酒糟內含有多種生長類物質，對農作物生長具有刺激作用。因此，以酒糟為主要基質制作微生物菌肥具有廣闊的應用前景，并且在實現酒糟有效利用的同時，還可代替傳統化學肥料和農藥發揮促生和提高作物抗性的目的，能夠帶來較好的社會效益和環境效益。

然而，目前有關利用白酒酒糟為主要基質制作木霉菌肥的例子很少，與其它以糧食等作為主要原料進行木霉的固態發酵相比，采用酒糟作為主要原料具有成本低，減少酒糟亂堆放造成的環境污染，在減少化學肥料用量的同時，促進植物生長，改善土壤環境質量，提升植物品質。

發明內容

本發明目的在于提供一種擬康氏木霉固態發酵的方法及其應用，以解決擬康氏木霉固態發酵產孢量少、成本高、時間長等問題，并提高酒糟、麥麩等工農業廢料的再利用率。同時，將本發明擬康氏木霉固態發酵物接種至黃豆，可促進其生長，改善黃豆生理和土壤環境質量。

本發明采用如下技術方案實現發明目的：

一種擬康氏木霉固態發酵的方法，該方法包括如下步驟：

(1)擬康氏木霉液體菌種的制備：在無菌條件下，將擬康氏木霉接種于PDA平板培養基上培養，待菌絲長滿整個培養皿，菌落表面產生綠色孢子后，用無菌水洗脫培養基上的孢子，無菌水稀釋后，得擬康氏木霉液體菌種；

(2)固態發酵基質的制備：將酒糟、麥麩、營養液和水混合后，裝于容器中，滅菌，得固態培養基；

(3)擬康氏木霉固態發酵：向固態培養基中接入擬康氏木霉液體菌種，光照培養，發酵結束后攪拌混勻，得擬康氏木霉固態發酵物。

前述的擬康氏木霉固態發酵的方法中，擬康氏木霉購買自中國科學院微生物研究所菌種保藏中心，其生物保藏號為：CGMCC3.3002。

前述的擬康氏木霉固態發酵的方法中，所述步驟(1)是：在無菌條件下，將擬康氏木霉接種于PDA平板培養基上，27-29℃恒溫培養5-7d后，待菌絲長滿整個培養基，菌落表面產生綠色孢子后，用無菌水洗脫培養基上的孢子，用無菌水稀釋孢子濃度為1.0×10⁶個/mL，得擬康氏木霉液體菌種。

優選的，所述步驟(1)是：在無菌條件下，將擬康氏木霉接種于PDA平板培養基上，28℃恒溫培養6d后，待菌絲長滿整個培養基，菌落表面產生綠色孢子后，用無菌水洗脫培養基上的孢子，用無菌水稀釋孢子濃度為1.0×10⁶個/mL，得擬康氏木霉液體菌種。

前述的擬康氏木霉固態發酵的方法中，所述步驟(2)是：將酒糟、麥麩、營養液和自來水混合后，裝于250mL三角瓶中，經121℃高壓滅菌20-30min，得固態發酵培養基。