[發明專利]一種擬康氏木霉固態發酵的方法及其應用

有效

• 申請號: 202110507710.3
• 申請日: 2021-05-10
• 公開（公告）號: CN113151011B
• 公開（公告）日: 2023-06-06
• 發明（設計）人: 于存;呂俊;蔣仙;祝靜;雷嬌嬌
• 申請（專利權）人: 貴州大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C05G1/00;C05F17/20;C12R1/885
• 代理公司: 貴州聯德佳為知識產權代理事務所(普通合伙) 52123
• 代理人: 張梅

1.一種擬康氏木霉固態發酵的方法，其特征在于：該方法包括如下步驟：

（1）擬康氏木霉液體菌種的制備：在無菌條件下，將擬康氏木霉接種于PDA平板培養基上培養，待菌絲長滿整個培養皿，菌落表面產生綠色孢子后，用無菌水洗脫培養基上的孢子，無菌水稀釋后，得擬康氏木霉液體菌種；

（2）固態發酵基質的制備：將酒糟、麥麩、營養液和水混合后，裝于容器中，滅菌，得固態培養基；所述營養液組成為：(NH₄)₂SO_4?1.4g/L、MgSO_4?0.3g/L、KH₂PO_4?2.0g/L、CaCL_2?0.3g/L、FeSO_4?5.0mg/L、MnSO_4?1.6mg/L、ZnSO_4?1.4mg/L和CoCL_2?2.0mg/L；

（3）擬康氏木霉固態發酵：向固態培養基中接入擬康氏木霉液體菌種，光照培養，發酵結束后攪拌混勻，得擬康氏木霉固態發酵物。

2.根據權利要求1所述的擬康氏木霉固態發酵的方法，其特征在于：所述步驟（1）是：在無菌條件下，將擬康氏木霉接種于PDA平板培養基上，27-29℃恒溫培養5-7d后，待菌絲長滿整個培養基，菌落表面產生綠色孢子后，用無菌水洗脫培養基上的孢子，用無菌水稀釋孢子濃度為1.0×10⁶個/mL，得擬康氏木霉液體菌種。

3.根據權利要求1所述的擬康氏木霉固態發酵的方法，其特征在于：所述步驟（2）是：將酒糟、麥麩、營養液和自來水混合后，裝于250mL三角瓶中，經121℃高壓滅菌20-30min，得固態發酵培養基。

4.根據權利要求1所述的擬康氏木霉固態發酵的方法，其特征在于：所述步驟（3）是：向固態發酵培養基中接入擬康氏木霉液體菌種1.5mL，25℃光照培養6-7d，發酵結束后攪拌混勻，得擬康氏木霉固態發酵物。

5.根據權利要求1所述的擬康氏木霉固態發酵的方法，其特征在于：所述酒糟為粉末玉米酒糟，其制作方法是將玉米酒糟經75-85℃烘干至恒重后，用粉碎機粉碎，得粉末玉米酒糟。

6.根據權利要求1所述的擬康氏木霉固態發酵的方法，其特征在于：所述固態培養基中酒糟和麥麩的質量百分比為8-12%和14-18%；所述步驟（2）中，營養液和水的加入量是：每10g酒糟和麥麩的混合物中加入營養液1.8-2.2mL、加入自來水20-30mL。

7.根據權利要求6所述的擬康氏木霉固態發酵的方法，其特征在于：所述固態培養基中酒糟和麥麩的質量百分比為10.81%和16.21%；所述步驟（2）中，營養液和水的加入量是：每10g酒糟和麥麩的混合物中加入營養液2mL、加入自來水25mL。

8.根據權利要求1-7任一項所述的擬康氏木霉固態發酵的方法的應用，其特征在于：將擬康氏木霉固態發酵的方法制得的擬康氏木霉固態發酵物用于提高黃豆生長，改善黃豆生理和土壤環境質量。