[發明專利]一種用于檢測特納綜合征的引物及探針組合物、非診斷檢測方法及試劑盒

在審

• 申請號: 202110507164.3
• 申請日: 2021-05-10
• 公開（公告）號: CN113005196A
• 公開（公告）日: 2021-06-22
• 發明（設計）人: 于超計;吳文立;王倩玉;趙立明
• 申請（專利權）人: 北京華瑞康源生物科技發展有限公司
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12Q1/6851;C12N15/11
• 代理公司: 成都頂峰專利事務所(普通合伙) 51224
• 代理人: 楊俊華

1.一種用于檢測特納綜合征的引物及探針組合物，其特征在于，所述引物及探針組合物包括兩組靶基因特異性引物對及兩組探針、一組內參基因特異性引物對及探針；

所述兩組靶基因包括AR基因和SRY基因；所述內參基因為CFTR基因；

所述AR基因特異性引物對及探針包括AR基因特異性上游引物核苷酸序列SEQ IDNO.1、AR基因特異性下游引物核苷酸序列SEQ ID NO.2和AR基因探針核苷酸序列SEQ IDNO.3；

所述SRY基因特異性引物對及探針包括SRY基因特異性上游引物核苷酸序列SEQ IDNO.4、SRY基因特異性下游引物核苷酸序列SEQ ID NO.5和SRY基因探針核苷酸序列SEQ IDNO.6；

所述CFTR基因特異性引物對及探針包括CFTR基因特異性上游引物核苷酸序列SEQ IDNO.7、CFTR基因特異性下游引物核苷酸序列SEQ ID NO.8和CFTR基因探針核苷酸序列SEQID NO.9；

所述AR基因、SRY基因和CFTR基因的探針所示核苷酸序列的5′端分別標記有熒光基團，所示核苷酸序列的3′端分別標記有淬滅基團。

2.根據權利要求1所述的一種用于檢測特納綜合征的引物及探針組合物，其特征在于，所述熒光基團包括FAM、NED和Cy5中的任意一種；

所述淬滅基團包括QSY。

3.一種用于檢測特納綜合征的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括如權利要求1所述的引物及探針的組合物、PCR反應液、混合液和對照品。

4.根據權利要求3所述的一種用于檢測特納綜合征的試劑盒，其特征在于，所述PCR反應液包括基因特異性引物對反應液和基因探針反應液；

所述基因特異性引物對反應液濃度為100-800nmol/L，優選為400nmol/L；

所述基因探針反應液濃度為50-300nmol/L，優選為200nmol/L。

5.根據權利要求3所述的一種用于檢測特納綜合征的試劑盒，其特征在于，所述混合液包括熱啟動Taq酶、UNG酶、4種dNTP、PCR反應緩沖液、ROX熒光參比染料。

6.根據權利要求3所述的一種用于檢測特納綜合征的試劑盒，其特征在于，所述對照品包括陽性對照品、正常對照品和空白對照品。

7.根據權利要求6所述的一種用于檢測特納綜合征的試劑盒，其特征在于，所述陽性對照品包括特異性質粒為內參照CFTR基因、AR基因的人工合成DNA序列的質粒混合液和SRY基因的人工合成DNA序列的質粒混合液，

所述特異性質粒為內參照CFTR基因、AR基因的人工合成DNA序列的質粒混合液和SRY基因的人工合成DNA序列的質粒混合液的拷貝數比為1：1：1。

8.根據權利要求6所述的一種用于檢測特納綜合征的試劑盒，其特征在于，所述正常對照品包括特異性質粒為內參照CFTR基因的人工合成DNA序列和AR基因的人工合成DNA序列的質粒混合液，

所述特異性質粒為內參照CFTR基因的人工合成DNA序列和AR基因的人工合成DNA序列的質?；旌弦旱目截悢当葹?：1。

9.根據權利要求6所述的一種用于檢測特納綜合征的試劑盒，其特征在于，所述空白對照品為經過除菌處理過的去離子水。

10.一種用于特納綜合征的非診斷檢測方法，其特征在于，采用權利要求3-9中任一所述用于檢測特納綜合征的試劑盒的應用方式為檢測人外周血DNA的步驟。