[發(fā)明專利]一種用于檢測(cè)血清中VEGF含量的抗體對(duì)及其用途

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110505784.3
• 申請(qǐng)日: 2021-05-10
• 公開（公告）號(hào): CN113150157A
• 公開（公告）日: 2021-07-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉繼來;劉靜;程勇;王征
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廊坊天光生物技術(shù)有限公司
• 主分類號(hào): C07K16/28
• 分類號(hào): C07K16/28;C12N15/13;G01N33/74;G01N33/574
• 代理公司: 北京志霖恒遠(yuǎn)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11435
• 代理人: 韓亞偉

本申請(qǐng)?zhí)峁┮环N用于檢測(cè)血清中VEGF含量的抗體對(duì)及其用途，包括與VEGF的N端表位即SEQ I D NO:2所示氨基酸序列相結(jié)合的單克隆抗體Ant iVEGF_N和與VEGF的C端表位即SEQ I D NO:3所示氨基酸序列相結(jié)合的單克隆抗體Ant iVEGF_C，所述單克隆抗體Ant iVEGF_N包括SEQ I D NO:7所示氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和SEQ I D NO:11所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)，所述Ant iVEGF_C包括SEQ I D NO:17所示氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和SEQ I DNO:21所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)。本申請(qǐng)將VEGF抗原分成N端(SEQ I DNO:2)和C端(SEQ I D NO:3)兩段序列，并用這兩段序列分別免疫小鼠，篩選到高特異性和高靈敏性的抗體對(duì)Ant iVEGF_N和Ant iVEGF_C，通過該抗體對(duì)可以有效的測(cè)定血清中VEGF的含量，進(jìn)而便于腫瘤廣譜及早期篩查，大大提高了腫瘤早期篩查的準(zhǔn)確性。

技術(shù)領(lǐng)域

本申請(qǐng)涉及醫(yī)藥領(lǐng)域，尤其涉及一種用于檢測(cè)血清中VEGF含量的抗體對(duì)及其用途。

背景技術(shù)

血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(Vascular endothelial growth Factor，VEGF)是一種具有高度生物活性的功能性糖蛋白。它是特異性的、生理作用強(qiáng)大的內(nèi)皮細(xì)胞有絲分裂原，能作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞，使其增殖、遷移、管腔形成，參與血管生成并使毛細(xì)血管通透性增加；它可導(dǎo)致腫瘤血管異常生長(zhǎng)，阻礙抗腫瘤藥物有效輸送至腫瘤組織內(nèi)，并可刺激新生血管生長(zhǎng)因子增加。

VEGF最早在1983年由Senger等[Senger DR,PerruzziCA,FederJ.A highlyconserved vascular permeability factor secreted by a variety of human androdent tumor celllines[J].CancerRes，1986，46(11)：5629-5632.]發(fā)現(xiàn)，由兩條8個(gè)外顯子和7個(gè)內(nèi)含子組成的23kD的單鏈蛋白構(gòu)成。1994年，Kondo[Kondo S，A sano M，M atsuoK，et a1.Vascular endothelia l growth fac—tor/vascu l ar perm eability factoris d etectable in the sera of tum or—bearing m ice and cancer patients[J].Biochim Biophys Acta，1994，1221(2)：211—214.]等人首次報(bào)道了癌癥病人血清VEGF水平高于正常對(duì)照，從而開始了VEGF血液(包括血清和血漿)含量與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、以及治療過程中VEGF的變化的實(shí)驗(yàn)性臨床研究并獲得了大量的研究資料。VEGF近些年被作為一種能反應(yīng)腫瘤發(fā)生發(fā)展變化的物質(zhì)，研究較為廣泛。在檢索英文280余篇，中文230余篇的VEGF相關(guān)文獻(xiàn)中，95％以上的文獻(xiàn)證實(shí)了腫瘤病人血清VEGF水平增高的事實(shí)。腫瘤類型幾乎涵蓋了目前臨床大部分實(shí)體腫瘤和部分非實(shí)體腫瘤。VEGF血液水平不僅在腫瘤各期均增加，而且在其早期0-1期即增加，常規(guī)腫瘤標(biāo)志物只有4期癌癥和正常對(duì)照才有顯著性差異。VEGF被認(rèn)為是目前腫瘤廣譜及早期篩查最有意義的標(biāo)記物。由于VEGF的抗原較大，抗原制備的難度較大，同時(shí)，截止目前，還沒有針對(duì)VEGF臨床檢測(cè)的配對(duì)抗體報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

本申請(qǐng)為解決上述技術(shù)問題而提供一種用于檢測(cè)血清中VEGF含量的抗體對(duì)及其用途。

本申請(qǐng)所采取的技術(shù)方案是：本申請(qǐng)第一方面提供一種用于檢測(cè)血清中VEGF含量的抗體對(duì)，其特征在于：包括與VEGF的N端表位即SEQ ID NO:2所示氨基酸序列相結(jié)合的單克隆抗體AntiVEGF_N和與VEGF的C端表位即SEQ ID NO:3所示氨基酸序列相結(jié)合的單克隆抗體AntiVEGF_C，所述單克隆抗體AntiVEGF_N包括SEQ ID NO:7所示氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和SEQ ID NO:11所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)，所述AntiVEGF_C包括SEQ ID NO:17所示氨基酸序列的輕鏈可變區(qū)和SEQ ID NO:21所示氨基酸序列的重鏈可變區(qū)。