[發明專利]自組裝多肽、多肽水凝膠及其制備方法和用途

有效

• 申請號: 202110503639.1
• 申請日: 2021-05-10
• 公開（公告）號: CN113234125B
• 公開（公告）日: 2022-12-06
• 發明（設計）人: 陳超;玄起澤;王平;張琦;章葦
• 申請（專利權）人: 華東理工大學
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;A61K38/08;A61K9/06;A61P17/02;A61P3/10;A61P31/04;A61L26/00
• 代理公司: 上海智信專利代理有限公司 31002
• 代理人: 鄭暄;豆欣欣

本發明涉及一種自組裝多肽，所述的多肽的序列結構為：Fmoc?LFKFFK?NH₂。本發明還涉及一種多肽水凝膠及其制備方法和應用。本發明的有益效果在于：本發明制備得到的多肽水凝膠，具有較好的細胞相容性和血液相容性，并能夠促進L?929細胞的增殖與黏附伸展；能夠有效促進HUVEC細胞的遷移，并通過VEGFA與HIF?1α信號通路促進新血管的形成；能夠通過細胞膜破壞的方式殺滅革蘭氏陽性菌(MRSA)與革蘭氏陰性菌(銅綠假單胞菌)；在注入糖尿病小鼠MRSA感染的傷口處后，能夠有效殺滅傷口感染處的MRSA，顯著促進傷口的愈合和傷口處新血管的形成，并且不會對小鼠的其他組織產生毒性。

技術領域

本發明屬于生物醫學領域，涉及一種多肽水凝膠的制備方法及其應用，具體涉及一種用于促進糖尿病慢性傷口愈合的多肽水凝膠的制備方法及其應用。

背景技術

慢性傷口已成為公共醫療的嚴重威脅，給全世界帶來了巨大的醫療和財政負擔。慢性傷口，尤其是糖尿病性潰瘍，通常會伴有持續的微生物感染，約41％的糖尿病足潰瘍患者最終不得不截肢。更可怕的是，慢性傷口表面更易形成生物被膜，從而保護內部微生物免受抗生素的滲透和侵襲，以產生更多的耐藥細菌。事實證明，這種生物被膜存在于90％以上的慢性傷口中。除此之外，慢性傷口中的過度炎癥引起的細胞外基質(ECM)損傷使內皮細胞難以粘附，遷移和增殖，同樣也推遲傷口愈合。因此，臨床上迫切需要具有協同抗菌甚至抗生物被膜活性和ECM功能以促進細胞粘附和增殖的有效傷口敷料。

由于具有較好的可設計性，生物活性和多功能性，自組裝肽(SAP)已被證明是制造水凝膠的理想基元，尤其是用于克服慢性傷口的原位注射式水凝膠。淀粉樣蛋白作為一種自組裝肽的典型，傾向于形成具有豐富的β-折疊的納米纖維結構，這種結構早先被證實與神經退行性疾病有關，后來在材料和生物醫學的交叉學科中迅速發展。得益于其強大的自組裝特性，淀粉樣蛋白易于構建具有納米纖維基質的水凝膠。這些具有典型交叉β結構的納米纖維形成了獨特且高度有序的納米拓撲結構。納米纖維表面富含帶電和疏水性側鏈，賦予了淀粉樣蛋白水凝膠固有的粘附能力，這對于傷口愈合中的細胞粘附，增殖和遷移至關重要。同時，許多研究報道，淀粉樣蛋白組裝體的交叉-β結構也帶來了獨特的抗菌活性，這很可能源自人體對微生物感染的保護機制。總之，淀粉樣蛋白是一類兼具抗菌性能與細胞粘附性能的典型的多功能自組裝多肽。

苯酚可溶調節蛋白α3(PSMα3)在的金黃色葡萄球菌感染人類細胞中起著重要的毒性作用，而源自PSMα3的截斷多肽LFKFFK(LK6)保留了淀粉樣蛋白的粘附特性并獲得了額外的抗菌能力。與PSMα3不同，LK6在其纖維化中采用交叉β-折疊結構而不是交叉α-折疊結構，并且構象的轉變有助于其抗菌活性并避免了過度的細胞毒性。

基于以上陳述，本發明旨在提出一種基于淀粉樣蛋白截斷型多肽的水凝膠及其在促進糖尿病慢性傷口愈合中的應用。

發明內容

因此，本發明的目的即在提供一種自組裝多肽、多肽水凝膠及其制備方法和用途。

為解決現有技術的問題，本發明提供一種自組裝多肽，所述的多肽的序列結構為：Fmoc-LFKFFK-NH₂。

本發明提供一種多肽水凝膠，所述的多肽水凝膠包括所述的自組裝多肽。

本發明提供一種所述的多肽水凝膠的制備方法，所述的制備方法包括以下步驟：

S1、稱量所述的自組裝多肽凍干粉末于容器內；

S2、加入二甲基亞砜，使多肽完全溶解；

S3、加入PBS緩沖液，使多肽在溶液中分布均勻；

S4、將混勻后的多肽溶液靜置10分鐘以上，即可獲得穩定的多肽水凝膠。

較佳地，在所述的步驟S1中，多肽凍干粉末的純度≥95％。