[發(fā)明專利]一種HPLC-MS/MS聯(lián)用同時檢測人血漿中左旋蘭索拉唑和右旋蘭索拉唑的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110498547.9
• 申請日: 2021-05-08
• 公開（公告）號: CN113358768B
• 公開（公告）日: 2022-12-23
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 孫茜;高倩倩;李艷靜
• 申請（專利權(quán)）人: 南京一諾醫(yī)藥科技有限公司;南京海納醫(yī)藥科技股份有限公司;南京海納制藥有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86
• 代理公司: 南京思拓知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 32288
• 代理人: 呂鵬濤;王海云

1.一種HPLC-MS/MS聯(lián)用同時檢測人血漿中左旋蘭索拉唑和右旋蘭索拉唑的方法，其特征在于，它包括以下步驟：（1）人血漿樣品前處理；（2）液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用檢測；（3）人血漿中左旋蘭索拉唑和右旋蘭索拉唑的測定；

液相色譜條件包括：采用流動相A和流動相B為混合流動相進(jìn)行梯度洗脫，高相液相色譜儀器為Shimadzu LC-20AD系列；色譜柱為DaicelCHIRALPAK^? IC 手性柱，4.60 mm×150mm,5.0 μm；所述流動相A為體積比為95:5的乙腈-水；所述流動相B為包含0.05%乙酸的5mM乙酸銨水溶液-乙腈，其中，乙酸銨水溶液-乙腈的體積比為60:40；柱溫為25℃；流速為0.8mL/min；所述梯度洗脫過程如下：在0-0.5分鐘內(nèi)，流動相A和流動相B的體積比為55:45；在0.5-4.5分鐘內(nèi)，流動相A和流動相B的體積比由55:45勻速漸變至60:40；在4.5-4.6分鐘內(nèi)，流動相A和流動相B的體積比由60:40勻速漸變至90:10；在4.6-5.0分鐘內(nèi)，流動相A和流動相B的體積比為90:10；在5.0-5.1分鐘內(nèi)，流動相A和流動相B的體積比由90:10勻速漸變至55:45；在5.1-6.5分鐘內(nèi)，流動相A和流動相B的體積比為45:55；

質(zhì)譜條件包括：質(zhì)譜儀器為API 3000；采用電噴霧離子源，正離子多反應(yīng)監(jiān)測掃描，噴霧電壓3000 V，離子源溫度 550℃；左旋蘭索拉唑，[M+H]⁺，m/z 370.201→252.0，DP值30V，CE值16 V；右旋蘭索拉唑，[M+H]⁺，m/z 370.2→252.0，DP值30 V，CE值16 V；埃索美拉唑，[M+H]⁺，m/z 346.2→198.2，DP值24 V，CE值 15 V；

人血漿樣品前處理包括：取50μL人血漿樣品加入1.0 mL 96孔板中，向所有孔中加入25μL內(nèi)標(biāo)工作液和200μL乙腈，將96孔板以2000 rpm/min渦旋震蕩10 min，將96孔板在4℃的條件下以4000 rpm/min速度離心5 min，取200 μL上清液加入至干凈的96孔板中，經(jīng)氮氣流在40℃下吹干后加入200 μL體積比為50:50的乙腈-水混合后，即得待測樣品；將待測樣品置于自動進(jìn)樣器，進(jìn)行LC-MS/MS分析，進(jìn)樣量為5μL，進(jìn)樣器溫度5℃；

所述內(nèi)標(biāo)工作液的配制：稱取埃索美拉唑?qū)φ掌罚捎靡译嫒芙獠⑾♂尩玫綕舛葹?.5mg/ml埃索美拉唑的儲備液，再用體積比為50:50的乙腈與水混合溶液稀釋得到濃度為500ng/mL的內(nèi)標(biāo)工作液。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，該方法用于臨床藥代動力學(xué)樣本檢測。