[發明專利]一種用于干酪乳桿菌WKGL-101高密度培養配方及方法

在審

• 申請號: 202110494296.7
• 申請日: 2021-05-07
• 公開（公告）號: CN113046277A
• 公開（公告）日: 2021-06-29
• 發明（設計）人: 周亞男;王永平;王維新;周群;呂晉江
• 申請（專利權）人: 威凱海思（山東）生物工程有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/38;C12R1/245
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了一種用于干酪乳桿菌WKGL?101高密度培養配方及方法，所述方法具體如下：S1、種瓶培養基準備,S2、種子制備，S3、種子罐培養基準備，S4、種子罐培養，S5、發酵罐培養基準備，按照下述組份進行投料滅菌，番茄汁和胡蘿卜汁按照2:1質量比混合得到混合液；所述混合液為8 g/L；乳清粉32 g/L；葡萄糖36 g/L；乳糖8 g/L；酵母粉32 g/L；硫酸錳0.04 g/L；硫酸鎂0.1 g/L；S6、發酵罐培養，本發明對原粉生產過程中的發酵罐發酵過程進行了改良，達到高密度培養干酪乳桿菌WKGL?101的目的。

技術領域

本發明涉及一種干酪乳桿菌高密度培養方法，具體涉及一種用于干酪乳桿菌WKGL-101高密度培養配方及方法，屬于干酪乳桿菌培養技術領域。

背景技術

干酪乳桿菌屬于乳桿菌屬，為不產芽抱，無鞭毛不運動，接觸酶反應陰性的革蘭氏陽性菌，屬于兼性異型發酵型，能發酵多種糖，可發酵產生有機酸、細菌素等多種抑菌物質。適宜生長溫度35-39℃，pH為5.5-6.2，具有良好的耐酸性、耐膽汁鹽性、耐鹽性以及抗藥性。大量研究表明干酪乳桿菌在降血脂、降膽固醇、降血壓，提高腸道健康有明顯作用；除此之外其在抗氧化、抗衰老、抗腫瘤、預防呼吸道疾病、抗敏性、抑菌性和增強免疫力方面也表現出積極的作用。一般情況下，干酪乳桿菌是通過正常攝食途徑攝入，具備抵抗胃酸、膽汁以及胰酶的能力，最終在腸道中定殖，從而發揮積極作用，達到有益效果；因此，提升益生菌產品中活性菌體細胞的濃度是發揮其功效的必要條件之一；但是通過常規配方培養干酪乳桿菌，生產成本較高且菌數到一定OD值后便很難再增加；基于以上考慮，在保證生產質量的前提下，尋求低成本、易操作、高密度培養效果顯著的培養配方及方法，提高生產效益是本發明的目標。

發明內容

為解決上述問題，本發明提出了一種用于干酪乳桿菌WKGL-101高密度培養配方及方法，在保證生產質量的前提下，對干酪乳桿菌WKGL-101的高密度培養效果顯著,使得生產成本及銷售成本有所降低，生產效益提升明顯。

本發明的用于干酪乳桿菌WKGL-101高密度培養配方，所述配方組份具體如下：

番茄汁和胡蘿卜汁按照2:1質量比混合得到混合液；所述混合液為8 g/L；乳清粉32 g/L；葡萄糖36 g/L；乳糖8 g/L；酵母粉32 g/L；硫酸錳0.04 g/L；硫酸鎂0.1 g/L。

一種適用于干酪乳桿菌WKGL-101高密度培養方法，所述方法具體如下：

S1、種瓶培養基準備,按照基礎MRS培養基配方，配置3.5L液體培養基，121℃，滅菌20min；

S2、種子制備，將實驗室冷藏保存的,干酪乳桿菌WKGL-101菌種于正常環境中回溫1-2h，接種于液體培養基中，37±1℃培養16-20h，制成種子液；

S3、種子罐培養基準備，種子罐配方使用常規培養配方，投料后滅菌，升溫至規定溫度保溫保壓30min；對種子罐發酵液進行鏡檢觀察是否污染雜菌，確認無污染后，再進行轉種；

S4、種子罐培養，將生長好的種子液通過無菌操作轉種至100L種子罐中進行培養，接種量為5%，37±1℃培養至干酪乳桿菌對數期中后期，時間為15h；

S5、發酵罐培養基準備，按照權利要求1所述的高密度培養配方進行投料滅菌，

S6、發酵罐培養，種子罐中長好的發酵液全部接種至1000L大發酵罐中，接種量為10%，培養溫度37±1℃，間歇通氮氣培養，間歇攪拌發酵，攪拌轉速為78r/min，通過流加濃度為15%的氨水調節pH維持在5.8±0.2之間，期間于發酵罐耗堿高峰后根據測得殘糖濃度進行補料，補加濃度為70%葡萄糖，隨后維持殘糖量在5±1g/L，最終在發酵結束前2h停止補料；

S7、離心，發酵結束后，等待降溫，將發酵液離心，得到干酪乳桿菌菌泥；

S8、菌泥包被，無菌操作取出菌泥，于已滅完菌的包被罐中進行包被；

S9、凍干，包被完成后，對包被液進行凍干；