[發(fā)明專利]一種用于干酪乳桿菌WKGL-101高密度培養(yǎng)配方及方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 202110494296.7
• 申請日: 2021-05-07
• 公開（公告）號: CN113046277A
• 公開（公告）日: 2021-06-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周亞男;王永平;王維新;周群;呂晉江
• 申請（專利權(quán)）人: 威凱海思（山東）生物工程有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/38;C12R1/245
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種用于干酪乳桿菌WKGL-101高密度培養(yǎng)配方，其特征在于，所述配方組份具體如下：

番茄汁和胡蘿卜汁按照2:1質(zhì)量比混合得到混合液；所述混合液為8 g/L；乳清粉32 g/L；葡萄糖36 g/L；乳糖8 g/L；酵母粉32 g/L；硫酸錳0.04 g/L；硫酸鎂0.1 g/L。

2.一種適用于干酪乳桿菌WKGL-101高密度培養(yǎng)方法，所述方法具體如下：

S1、種瓶培養(yǎng)基準(zhǔn)備,按照基礎(chǔ)MRS培養(yǎng)基配方，配置3.5L液體培養(yǎng)基，121℃，滅菌20min；

S2、種子制備，將實(shí)驗(yàn)室冷藏保存的,干酪乳桿菌WKGL-101菌種于正常環(huán)境中回溫1-2h，接種于液體培養(yǎng)基中，37±1℃培養(yǎng)16-20h，制成種子液；

S3、種子罐培養(yǎng)基準(zhǔn)備，種子罐配方使用常規(guī)培養(yǎng)配方，投料后滅菌，升溫至規(guī)定溫度保溫保壓30min；對種子罐發(fā)酵液進(jìn)行鏡檢觀察是否污染雜菌，確認(rèn)無污染后，再進(jìn)行轉(zhuǎn)種；

S4、種子罐培養(yǎng)，將生長好的種子液通過無菌操作轉(zhuǎn)種至100L種子罐中進(jìn)行培養(yǎng)，接種量為5%，37±1℃培養(yǎng)至干酪乳桿菌對數(shù)期中后期，時(shí)間為15h；其特征在于：

S5、發(fā)酵罐培養(yǎng)基準(zhǔn)備，按照權(quán)利要求1所述的高密度培養(yǎng)配方進(jìn)行投料滅菌，

S6、發(fā)酵罐培養(yǎng)，種子罐中長好的發(fā)酵液全部接種至1000L大發(fā)酵罐中，接種量為10%，培養(yǎng)溫度37±1℃，間歇通氮?dú)馀囵B(yǎng)，間歇攪拌發(fā)酵，攪拌轉(zhuǎn)速為78r/min，通過流加濃度為15%的氨水調(diào)節(jié)pH維持在5.8±0.2之間，期間于發(fā)酵罐耗堿高峰后根據(jù)測得殘?zhí)菨舛冗M(jìn)行補(bǔ)料，補(bǔ)加濃度為70%葡萄糖，隨后維持殘?zhí)橇吭?±1g/L，最終在發(fā)酵結(jié)束前2h停止補(bǔ)料；

S7、離心，發(fā)酵結(jié)束后，等待降溫，將發(fā)酵液離心，得到干酪乳桿菌菌泥；

S8、菌泥包被，無菌操作取出菌泥，于已滅完菌的包被罐中進(jìn)行包被；

S9、凍干，包被完成后，對包被液進(jìn)行凍干；

S10、粉碎，凍干完成后，粉碎凍干塊制備干酪乳桿菌原粉。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用于干酪乳桿菌WKGL-101高密度培養(yǎng)方法，其特征在于：所述發(fā)酵罐培養(yǎng)基準(zhǔn)備具體如下：首先制備番茄汁和胡蘿卜汁；所述番茄汁和胡蘿卜汁單獨(dú)制備后進(jìn)行混合，所述番茄汁和胡蘿卜汁制備過程一致，其具體如下：按照水料比1:1榨汁后備用，115℃滅菌20min；另外對配方剩余組分溶好后115±1℃，保溫保壓30min。