[發明專利]波倫鱗花軟珊瑚來源的二萜類化合物及其制備方法和用途

有效

• 申請號: 202110493629.4
• 申請日: 2021-05-07
• 公開（公告）號: CN113402391B
• 公開（公告）日: 2022-04-26
• 發明（設計）人: 晏霞;歐陽翰;何山;嚴小軍
• 申請（專利權）人: 寧波大學
• 主分類號: C07C69/732
• 分類號: C07C69/732;C07C67/48;C07C67/56;C07C33/14;C07C29/74;C07C29/76;C07C35/37;A61P31/04
• 代理公司: 寧波奧圣專利代理有限公司 33226
• 代理人: 何仲

本發明公開了波倫鱗花軟珊瑚來源的二萜類化合物及其制備方法和用途，特點是采從西沙波倫鱗花軟珊瑚所產生的次級代謝產物中分離得到，制備步驟如下1）將冷凍的波倫鱗花軟珊瑚提取液濃縮后再萃取得到浸膏；2）將粗浸膏進行葡聚糖凝膠柱色譜分離，以石油醚、二氯甲烷和甲醇的混合溶劑為流動相進行等度洗脫，共收集9個流分；將第2號流分進行正相減壓柱層析，以石油醚和乙酸乙酯的混合溶液為流動相乙腈和水的混合溶液為流動相，收集流分；再將第2號、第5號及第6號流分分別進行反相減壓柱層析，收集各自相應流分；最后對相應流分進行制備高效液相分離純化，得到六個二萜類新化合物，優點是化合物1?4和6對金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌具抑制作用。

技術領域

本發明涉及一種二萜類化合物，尤其是涉及一種波倫鱗花軟珊瑚來源的二萜類化合物及其制備方法和用途。

背景技術

中國南海地處熱帶和亞熱帶區域，海域廣闊，海洋生物資源豐富，是世界上珊瑚分布最廣泛的海域之一。自20世紀80年代以來，研究人員對南海采集的多種珊瑚的化學成分進行了研究，目前已分離出許多結構新穎的化合物，如甾體、萜類、生物堿等。其中，Lemnalia屬軟珊瑚具有結構多樣的新萜類化合物，主要包括具有良好生物活性的倍半萜類和二萜苷類化合物。

在我們探索海洋軟珊瑚生物活性次生代謝產物的過程中，通過水肺潛水技術在西沙群島海域（10米深）處采集到了一種軟珊瑚Lemnaliasp.（編號XSSC201907）。從其丙酮提取物獲得了6個新的二萜類化合物，進一步活性篩選結果表明化合物1-4和6對金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌具抑制作用。目前尚未見這些化合物的化學結構及抗菌活性的報道，因此市場上也尚未見有與此相關的藥物。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種具有抗金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌的生物活性波倫鱗花軟珊瑚來源的二萜類化合物及其制備方法和用途。

本發明解決上述技術問題所采用的技術方案為：一種波倫鱗花軟珊瑚來源的二萜類化合物，從南海西沙Lemnalia屬軟珊瑚中提取分離到，化學結構式如下至少一種所示：

。

上述波倫鱗花軟珊瑚來源的二萜類化合物的制備方法，包括以下步驟：

（1）將冷凍的波倫鱗花軟珊瑚用由等體積的二氯甲烷和甲醇組成的混合液提取5次，減壓濃縮后用由等體積的乙醚和水組成的混合液萃取4次，合并乙醚萃取液，并減壓濃縮，得到粗浸膏；

（2）將上述粗浸膏首先用20-30mL的二氯甲烷溶解后進行葡聚糖凝膠柱層析，采用體積比為2：1：1的石油醚/二氯甲烷/甲醇溶液為洗脫劑進行洗脫，逐管收集流分，按分子量從大到小排列，合并得到4個組分；

（3）將步驟（2）得到的第2個組分進行中壓正相柱層析，采用體積比為（50：1）-（1:1）的石油醚/乙酸乙酯溶液為流動相進行梯度洗脫，按序合并相似流分，共得到9個組分；

（4）將步驟（3）得到的第3個組分進行中壓反相柱層析，采用乙腈含量為50-100%的乙腈水溶液為流動相進行梯度洗脫，按序合并相似流分，共得到6個組分；將第5個組分進行高效液相色譜分離純化，采用甲醇含量為97%的甲醇水溶液為流動相進行等度洗脫，獲得到二萜類化合物4（biofloranate D）；

（5）將步驟（3）得到的第5個組分進行中壓反相柱層析，采用乙腈含量為40-100%的乙腈水溶液為流動相進行洗脫，按序合并相似流分，共得到4個組分；

（6）將步驟（5）得到的第2個組分進行高效液相色譜分離純化，采用甲醇含量為87%的甲醇-水溶液為流動相進行等度洗脫，得到二萜類化合物5 (euplexaurene D)和二萜類化合物6（cneorubin K）；