[發(fā)明專利]一種巨噬細(xì)胞外泌體膜包被仿生納米顆粒及其制備方法和應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110493229.3
• 申請日: 2021-05-07
• 公開（公告）號: CN113197880B
• 公開（公告）日: 2021-11-12
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 呂坤;裴緯亞;張鶯鶯
• 申請（專利權(quán)）人: 皖南醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院（皖南醫(yī)學(xué)院弋磯山醫(yī)院）
• 主分類號: A61K9/51
• 分類號: A61K9/51;A61K47/46;A61K47/34;A61K47/59;A61K47/69;A61K31/7088;A61P11/06;A61P37/08
• 代理公司: 南京燦爛知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 32356
• 代理人: 趙麗

1.一種巨噬細(xì)胞外泌體膜包被仿生納米顆粒，其特征在于，其由外泌體膜包被納米顆粒形成，所述的納米顆粒為表面與聚醚酰亞胺PEI偶聯(lián)的納米顆粒PLGA@Dnmt3aos^{smartsilencer}；所述的外泌體膜從骨髓來源的M2巨噬細(xì)胞分離得到；所述的納米顆粒PLGA@Dnmt3aos^{smartsilencer}由聚乳酸-乙醇酸共聚物PLGA和Dnmt3aos^{smartsilencer}共乳化形成。

2.權(quán)利要求1所述的巨噬細(xì)胞外泌體膜包被仿生納米顆粒的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

1)納米顆粒PLGA@Dnmt3aos^{smartsilencer}的制備；

2)骨髓M2巨噬細(xì)胞外泌體膜的制備；

3)在納米顆粒PLGA@Dnmt3aos^{smartsilencer}上覆蓋骨髓M2巨噬細(xì)胞外泌體膜而制成巨噬細(xì)胞外泌體膜包被的仿生納米顆粒；

在步驟1)和2)之間，還包括使納米顆粒PLGA@Dnmt3aos^{smartsilencer}表面與聚醚酰亞胺PEI偶聯(lián)的步驟。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的M2巨噬細(xì)胞外泌體膜包被仿生納米顆粒的制備方法，其特征在于，步驟1)具體為：將60μg PLGA、2ug Dnmt3aos^{smartsilencer}分別溶解后混合乳化，產(chǎn)生初級乳液；將乳化劑加入到初級乳液中，進(jìn)一步乳化；收集納米顆粒PLGA@Dnmt3aos^{smartsilencer}。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的M2巨噬細(xì)胞外泌體膜包被仿生納米顆粒的制備方法，其特征在于，使納米顆粒PLGA@Dnmt3aos^{smartsilencer}表面與聚醚酰亞胺PEI偶聯(lián)的步驟具體為：將納米顆粒PLGA@Dnmt3aos^{smartsilencer}與1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽和正羥基琥珀酰亞胺溶液混合以活化納米顆粒表面；然后滴加聚醚酰亞胺PEI攪拌1小時；收集PEI偶聯(lián)的納米顆粒。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的M2巨噬細(xì)胞外泌體膜包被仿生納米顆粒的制備方法，其特征在于，步驟2)具體為：極化骨髓巨噬細(xì)胞向M2型轉(zhuǎn)換，收集M2巨噬細(xì)胞的上清液，離心沉淀，除去細(xì)胞碎片；將最后的上清液離心，以獲得外泌體；將收獲的外泌體重懸于冰冷的TM緩沖液中，反復(fù)凍融5次；添加0.25M蔗糖重懸，離心；收集上清液，進(jìn)一步離心，以收集沉淀為外泌體膜。

6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的M2巨噬細(xì)胞外泌體膜包被仿生納米顆粒的制備方法，其特征在于，將外泌體膜和表面偶聯(lián)PEI的PLGA@Dnmt3aos^{smartsilencer}共孵育并超聲處理，得到M2巨噬細(xì)胞外泌體膜包被仿生納米顆粒。

7.包含權(quán)利要求1所述的納米顆粒的過敏性哮喘治療性藥物或者藥物載體。

8.權(quán)利要求2-6任意一項所述的制備方法在制備過敏性哮喘治療性藥物或者藥物載體中的用途。