[發明專利]一種表達病毒樣顆粒的細胞核轉化的轉基因植物的制備方法及其在抵抗棉鈴蟲中的應用

有效

• 申請號: 202110491857.8
• 申請日: 2021-05-06
• 公開（公告）號: CN113061623B
• 公開（公告）日: 2022-11-08
• 發明（設計）人: 張江;任康;姜春妹;付金秋;常玲
• 申請（專利權）人: 湖北大學
• 主分類號: C12N15/84
• 分類號: C12N15/84;C12N15/113;C12N15/40;A01H5/12;A01H6/82
• 代理公司: 北京金智普華知識產權代理有限公司 11401
• 代理人: 藍曉玉

1.一種表達病毒樣顆粒的細胞核轉化的轉基因植物的制備方法，其特征在于：通過農桿菌介導的細胞核轉化技術將病毒衣殼蛋白與抑制害蟲關鍵基因的hpRNA在植物中進行重組表達，獲得表達重組病毒樣顆粒的轉基因植物；所述抑制棉鈴蟲的關鍵基因Ace1基因如SEQ ID NO.3所示；所述病毒衣殼蛋白包括MS2噬菌體衣殼蛋白和跨膜肽TAT；所述病毒衣殼蛋白為2個拷貝的MS2衣殼蛋白，且在第二個拷貝的MS2衣殼蛋白AB loop結構域融合了一段跨膜肽序列TAT，整體序列見SEQ ID NO.2所示。

2.如權利要求1中所述的抗棉鈴蟲的植物的制備方法，其特征在于：通過農桿菌介導的細胞核轉化技術將病毒衣殼蛋白與抑制棉鈴蟲的關鍵基因的hpRNA在植物中進行重組表達獲得。

3.根據權利要求1所述的抗棉鈴蟲的植物的制備方法，其特征在于：所述植物包括煙草。

4.根據權利要求1所述的抗棉鈴蟲的植物的制備方法，其特征在于：目標基因導入農桿菌的方法包括電轉化方法和凍融法中的任一種。

5.根據權利要求1所述的抗棉鈴蟲的植物的制備方法，其特征在于：以質粒pBl121為表達載體，構建表達如SEQ ID NO.3所示的Ace1基因的hpRNA和SEQ ID NO.2所示的MS2病毒衣殼蛋白的植物載體，并轉化至煙草葉片中，培養獲得抗棉鈴蟲的植物。

6.如權利要求1-5任一項所述的制備方法制備的轉基因植物在制備抗棉鈴蟲的植物中的應用。