[發(fā)明專利]一種診斷標(biāo)志物及其在COVID-19診斷及冠狀病毒既往感染檢測(cè)中的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110490217.5
• 申請(qǐng)日: 2021-05-06
• 公開（公告）號(hào): CN112964884B
• 公開（公告）日: 2022-04-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陶生策;李陽;賴丹昀;江何偉;張海南;祁環(huán);馬明亮
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海交通大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N33/68
• 分類號(hào): G01N33/68;G01N33/58;G01N33/569;G01N33/543
• 代理公司: 上海漢聲知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31236
• 代理人: 胡晶

本發(fā)明公開一種診斷標(biāo)志物及在COVID?19診斷及冠狀病毒既往感染檢測(cè)中的應(yīng)用。所述診斷標(biāo)志物包括肽段COVID19?V001，所述肽段COVID19?V001的氨基酸序列為：包含F(xiàn)KEELDKYFKNH中5個(gè)及5個(gè)以上連續(xù)氨基酸的序列；或所述肽段COVID19?V001的氨基酸序列為：包含F(xiàn)KEELDKYFKNH中1個(gè)到幾個(gè)氨基酸的取代或/和缺失或/和添加所形成的序列?；诒景l(fā)明的診斷標(biāo)志物應(yīng)用間接法定性檢測(cè)人血清中抗肽段的IgG抗體的水平。通過基于本發(fā)明所建立的檢測(cè)試劑盒，可作為新型冠狀病毒肺炎(COVID?19)及診斷的一種輔助手段，還可作為區(qū)分感染和疫苗接種的手段。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種診斷標(biāo)志物及其在COVID-19診斷及冠狀病毒既往感染檢測(cè)中的應(yīng)用，尤其涉及一種肽段COVID19-V001及其衍生物在診斷新型冠狀病毒肺炎(COVID-19)試劑盒中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

SARS-CoV-2為一種新型的β屬冠狀病毒新毒株，可跨越物種屏障感染人類，可通過密切接觸、呼吸道飛沫、高濃度氣溶膠傳播，引起以肺部病變?yōu)橹鞯膫魅静。部烧T發(fā)包括神經(jīng)系統(tǒng)和消化系統(tǒng)在內(nèi)的全身性損傷，嚴(yán)重者可導(dǎo)致死亡(Lancet.2020Feb15；395(10223):514-523)。基于目前尚無針對(duì)SARS-CoV-2的有效藥物，以及疫苗尚處于臨床驗(yàn)證階段的現(xiàn)狀，準(zhǔn)確的早期診斷、及時(shí)的隔離治療是控制疫情的關(guān)鍵。

截至2020年3月27日，國家藥監(jiān)局已經(jīng)應(yīng)急批準(zhǔn)了23個(gè)新型冠狀病毒檢測(cè)產(chǎn)品(其中新冠病毒核酸檢測(cè)試劑15個(gè)，抗體檢測(cè)試劑8個(gè))以滿足疫情防控用檢測(cè)試劑的需求(http://www.nmpa.gov.cn/)。“呼吸道標(biāo)本或血液標(biāo)本實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)新型冠狀病毒核酸陽性或病毒基因測(cè)序與已知的新型冠狀病毒高度同源”是新型冠狀病毒肺炎(COVID-19)診斷的金標(biāo)準(zhǔn)(http://www.nhc.gov.cn/wjw/)。核酸檢測(cè)雖然具備靈敏度高，特異性強(qiáng)的優(yōu)勢(shì)，但結(jié)果易受取樣部位，樣本質(zhì)量，實(shí)驗(yàn)操作的限制而導(dǎo)致與COVID-19影像學(xué)表現(xiàn)不一致亦或“假陰性”，不僅如此，核酸檢測(cè)對(duì)實(shí)驗(yàn)環(huán)境及操作人員的要求較高，耗時(shí)較長，檢測(cè)人員感染風(fēng)險(xiǎn)高。

作為免疫系統(tǒng)抵抗病毒的重要效應(yīng)分子，血液中的特異性抗體成為診斷病毒感染的另一依據(jù)。國家衛(wèi)生健康委員會(huì)在2020年3月3日發(fā)布的《新型冠狀病毒診療方案(試行第七版)》中，正式在原有核酸檢測(cè)和測(cè)序基礎(chǔ)上增加“血清學(xué)檢測(cè)”作為依據(jù)，即“新型冠狀病毒特異性IgM抗體和IgG抗體陽性”或“新型冠狀病毒特異性IgG抗體由陰性轉(zhuǎn)為陽性或恢復(fù)期較急性期4倍及以上升高”也可確診(http://www.nhc.gov.cn/wjw/)。新冠病毒抗體檢測(cè)試劑盒主要包括IgG抗體和IgM抗體檢測(cè)。通常情況下，免疫系統(tǒng)產(chǎn)生IgM抗體較早，感染后一周內(nèi)出現(xiàn)，通常預(yù)示急性感染，可利用該抗體檢測(cè)陽性作為早期感染的指標(biāo)；IgG則產(chǎn)生較晚，但維持時(shí)間相對(duì)更長，可利用該抗體檢測(cè)陽性作為感染和既往感染的依據(jù)(Clinicaland Vaccine Immunology,2004,11(4):665-668)。通過膠體金免疫層析法或磁微?；瘜W(xué)發(fā)光法找到疑似患者血清樣本中的特異性抵抗病毒的抗體，從而協(xié)助判斷患者的感染情況，此即為新冠病毒抗體檢測(cè)試劑盒的原理?？贵w檢測(cè)只需采取患者極少量血樣，且對(duì)實(shí)驗(yàn)環(huán)境及檢測(cè)人員要求沒有核酸檢測(cè)苛刻，操作簡易且時(shí)間短，在提高檢測(cè)效率的同時(shí)也能很大程度地降低檢測(cè)人員的感染風(fēng)險(xiǎn)，與核酸檢測(cè)優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)，可降低“假陰性”率，是一種高效有保障的輔助診斷手段，更為后續(xù)基層檢測(cè)、居家檢測(cè)提供一種方便可靠的篩查手段。