[發明專利]一種診斷標志物及其在COVID-19診斷及冠狀病毒既往感染檢測中的應用

有效

• 申請號: 202110490217.5
• 申請日: 2021-05-06
• 公開（公告）號: CN112964884B
• 公開（公告）日: 2022-04-08
• 發明（設計）人: 陶生策;李陽;賴丹昀;江何偉;張海南;祁環;馬明亮
• 申請（專利權）人: 上海交通大學
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/58;G01N33/569;G01N33/543
• 代理公司: 上海漢聲知識產權代理有限公司 31236
• 代理人: 胡晶

1.一種COVID-19的診斷標志物在制備用于COVID-19的診斷試劑盒、檢測SARS-CoV-2病毒既往感染的檢測試劑盒或可區分新型冠病毒感染與新型冠狀病毒滅活疫苗接種的檢測試劑盒中的應用，所述診斷標志物為肽段COVID19-V001，所述肽段COVID19-V001的氨基酸序列為FKEELDKYFKNH，或氨基酸序列FKEELDKYFKNH中包含1個或幾個氨基酸的缺失或突變所形成的序列。

2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述診斷標志物通過SMCC與BSA偶聯，形成SMCC-BSA-肽偶聯產物。

3.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述試劑盒還包括標準品、包被緩沖液、封閉液、樣品稀釋液、終止液、酶標試劑、酶底物溶液和洗滌液。

4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于，所述標準品包括抗診斷標志物的IgG抗體的濃度為0 U/mL的標準血清1和抗診斷標志物的IgG抗體的濃度為100 U/mL的標準血清2；所述標準血清1為正常人血清，標準血清2為COVID19-V001抗體為陽性的血清；

所述肽段COVID19-V001抗原采用包被緩沖液稀釋，所述包被緩沖液為0.05±0.005 M、pH 9.6±0.05的碳酸鹽緩沖液，即每1 L 溶液中含1.59 g Na₂CO₃，2.93 g NaHCO₃；

所述封閉液為含3% 牛血清白蛋白的0.01±0.005 M、 pH 7.4±0.05的磷酸鹽-NaCl緩沖液（PBS）溶液，即每1 L中含有5 g牛血清白蛋白（BSA），8 g NaCl，0.2 g KH₂PO₄，2.9 gNa₂HPO₄·12H₂O，0.2 g KCl；

所述酶底物溶液包括：顯色劑A：500 mL溶液中含醋酸鈉13.6 g，檸檬酸1.6 g，30%雙氧水0.3 mL；顯色劑B：500 mL溶液中含TMB 350 mg，DMSO 20 mL，檸檬酸·H₂O 5.1 g；

所述標準品與待測血清樣品采用樣品稀釋液進行稀釋，所述樣品稀釋液為0.01 M pH7.4磷酸鹽-NaCl緩沖液（PBS）；

所述洗滌采用的洗滌液為含0.05% Tween-20的、0.01±0.005 M、 pH 7.4±0.05磷酸鹽-NaCl緩沖液（PBST），即每1升溶液中含8 g NaCl，0.2 g KH₂PO₄，2.9 g Na₂HPO₄·12H₂O，0.2 g KCl，0.5 mL Tween-20；

所述終止液為2±0.1 M H₂SO₄溶液；

所述酶標試劑為含有辣根過氧化物酶標記的anti-Human IgG抗體的酶標試劑。