[發明專利]一種用于細辛屬植物材料快速鑒定的PCR引物、試劑盒及其應用在審
| 申請號： | 202110489539.8 | 申請日： | 2021-05-06 |
| 公開（公告）號： | CN113186331A | 公開（公告）日： | 2021-07-30 |
| 發明（設計）人： | 石俊霞;王超楠;姜帆;朱水芳 | 申請（專利權）人： | 中國檢驗檢疫科學研究院 |
| 主分類號： | C12Q1/6895 | 分類號： | C12Q1/6895;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京百歐知識產權代理事務所(普通合伙) 11930 | 代理人： | 鄒曉艷 |
| 地址： | 100176 北京市大*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 用于 細辛 植物 材料 快速 鑒定 pcr 引物 試劑盒 及其 應用 | ||
1.一種用于細辛屬植物快速鑒定的PCR引物，其特征在于：所述引物的核苷酸序列為：
上游引物Asa_F：5'-TATCTCTTTCTTTTTTTCAAAAGG-3'，
下游引物Asa_R：5'-ATGGGCTTTTGCCAATGAGCCAATC-3'。
2.一種用于細辛屬植物快速鑒定的試劑盒，其特征在于：包括權利要求1所述的PCR引物。
3.如權利要求2所述的試劑盒，其特征在于：還包括用于進行PCR擴增和/或PCR擴增產物電泳所需的試劑。
4.權利要求1所述的PCR引物在如下任一方面的應用：
(1)鑒定或輔助鑒定待測材料是否是細辛屬植物材料或是否含有細辛屬植物材料；
(2)制備鑒定或輔助鑒定待測材料是否是細辛屬植物材料或是否含有細辛屬植物材料的檢測試劑盒；
所述待測材料為植物材料、中成藥、保健品、食品或中藥原料藥。
5.一種細辛屬植物材料的快速鑒定方法，其特征在于，包括如下步驟：
(1)以待測材料提取的基因組DNA為模板，采用權利要求1所述的PCR引物或者權利要求2至3任一項所述的試劑盒進行PCR擴增，得到PCR產物；
(2)檢測所述PCR產物，若檢測到目標條帶，則待測材料是細辛屬植物材料或含有細辛屬植物材料；所述目標條帶大小為553bp。
6.如權利要求5所述的快速鑒定方法，其特征在于：所述PCR擴增的反應體系為：25μl的總反應體系中含有I-5TM 2xHigh-Fidelity Master Mix 12.5μl、10uM的Asa_F 1μl、10uM的Asa_R 1μl、ddH2O 9.5μl、DNA模板1μl。
7.如權利要求6所述的方法，其特征在于：所述PCR擴增的反應條件是：98℃預變性2min；98℃變性10s，58℃退火10s，72℃延伸5s，35個循環；72℃延伸2min。
8.如權利要求5所述的快速鑒定方法，其特征在于：所述步驟(2)中檢測得到的PCR產物的方法為瓊脂糖電泳檢測；優選采用在含goldview的1％瓊脂糖凝膠上進行電泳檢測。
9.如權利要求5-8任一所述的快速鑒定方法，所述待測材料為疑似含有細辛屬植物組織的植物材料、中成藥、保健品、食品或中藥原料藥。
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