[發明專利]一種癌癥和/或癌前病變檢測試劑盒

在審

• 申請號: 202110488557.4
• 申請日: 2021-05-06
• 公開（公告）號: CN113403393A
• 公開（公告）日: 2021-09-17
• 發明（設計）人: 成小威;陸艷;巴兆粉;于薇;穆文磊;陸志恒;張田田;王弢
• 申請（專利權）人: 江蘇為真生物醫藥技術股份有限公司;蘇州普瑞邁德醫學檢驗所有限公司
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12N15/11
• 代理公司: 北京三友知識產權代理有限公司 11127
• 代理人: 李棟修;龐東成

本發明涉及一種癌癥和/或癌前病變檢測試劑盒，其包括用于檢測NeuroG1基因甲基化的試劑和用于檢測SDC2基因甲基化的試劑，所述癌癥優選為結直腸癌，所述癌前病變是進展期腺瘤(AA)。本發明對NeuroG1和SDC2基因組合的甲基化進行聯合檢測，可以實現對多基因的聯合檢測，極大的降低了試驗的復雜程度，提高了檢測效率。另外，能夠僅以糞便作為檢測樣本，對結直腸癌，特別是不易發現的早期病變如AA進行可靠的診斷，取樣無創簡單，而且不會對病人造成任何的痛苦和不便。

技術領域

本發明屬于生物醫藥技術領域，尤其涉及一種癌癥和/或癌前病變檢測試劑盒，特別是用于癌癥DNA甲基化檢測試劑盒及其使用方法，涉及甲基化靶標、檢測引物和探針、捕獲試劑、檢測試劑及試劑盒的應用，所述癌癥優選為結直腸癌所述癌前病變是進展期腺瘤(AA)。

技術背景

結直腸癌(Colorectal cancer，CRC)是世界第三大惡性腫瘤，占全部惡性腫瘤的10％，其在惡性腫瘤中居第3位，嚴重威脅著人類的健康。近年來，隨著我國人民生活水平提高，飲食結構和習慣改變，預期壽命延長，人口老齡化趨勢等的影響，近年來我國結直腸癌發病率逐年上升，在男性腫瘤發病率中排第5位，在女性腫瘤發病率中排第4位；尤其在近十年，結直腸癌發病率的增加每年4％，遠超2％的國際水平，估計每年約有40萬新發病例，在我國消化系統惡性腫瘤中位列第二。結直腸癌在男性和女性腫瘤死亡率中都排在第5位。結直腸癌通常由癌前息肉經過一系列遺傳學和表觀遺傳學改變及組織學與形態學的變化緩慢發展而來，大多數結直腸腫瘤生長緩慢、保持沉默或無癥狀，直到它們達到了一定的大小或發展階段。因此，結直腸癌是可以通過篩查進行干預的理想靶標。早期結直腸癌患者手術5年生存率可高達90％以上，中、晚期患者5年生存率僅10％左右，而臨床診斷的結直腸癌約80％為中晚期，這是導致其死亡率居高不下的關鍵因素之一。經有效治療的早期結直腸癌患者其發病率降低60％，病死率降低80％，因此結直腸癌的早期發現、早期診斷及早期治療顯得尤為重要。

由于93％的結直腸癌源于腺瘤，早期多無特征性癥狀，而從腺瘤發展到癌癥需要大約10年，這就為早期篩查提供了時間基礎。因此，對結直腸癌高危人群的篩查，對結直腸癌患者的早發現、早診斷，從而實現結直腸癌患者早治療，是提高患者總體生存率的重要方面。

腺瘤可以分為非進展期腺瘤(NAA)和進展期腺瘤(AA：指直徑＞10mm或含有絨毛成份或有重度異型增生或高級別上皮內瘤變)。進展期腺瘤(AA)有較高風險繼發結直腸癌，而非進展期腺瘤(NAA)發生繼發性結直腸癌的風險與未發現息肉者相當。因此更有意義地是早發現、早診斷進展期腺瘤(AA)。

非專利文獻1(“Methylation of NEUROG1in Serum Is a Sensitive Marker forthe Detectionof Early Colorectal Cancer”,Herbst et al,The American Journal ofGASTROENTEROLOGY,2011；106:1110–1118；doi:10.1038/ajg.2011.6)公開了一種通過NEUROG1檢測早期結直腸癌的方法。在91％的特異性時，檢測大腸癌的敏感性達到61％。

ES2683866A1公開了一種體外診斷和篩選晚期結直腸癌和腺瘤的方法，在人體生物液體中進行檢測，其包括確定sCD26和NDKA蛋白質的總體水平、甲基化基因NEUROG1的百分比聯合測定。

RU2630669C1公開了一種鑒定結腸和直腸惡性病變的方法，其中例舉了數十種結直腸癌腫瘤標志物基因組，例如ADHFE1，ALX4，CNRIP1，EID3，ELMO1，ESR1，FBN1，HLTF，LAMA1，NEUROG1，NGFR，RARB，RXRG，RYR2，SDC2，SEPT9，SFRP2，SOCS3，SOX17，THBD，TMEFF2，UCHL1和VIM等，并具體給出了SEPT9的樣本檢測結果。