[發(fā)明專利]一種判斷華貴櫛孔扇貝低溫?fù)p傷程度的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110481874.3
• 申請日: 2021-04-30
• 公開（公告）號: CN113310838B
• 公開（公告）日: 2023-06-20
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 鄭懷平;朱雯璐;張傳旭;江勝
• 申請（專利權(quán)）人: 汕頭大學(xué)
• 主分類號: G01N5/00
• 分類號: G01N5/00;G01N5/04;G01N21/78
• 代理公司: 廣州三環(huán)專利商標(biāo)代理有限公司 44202
• 代理人: 彭妙玲;周增元

本發(fā)明公開了一種及時判斷華貴櫛孔扇貝低溫?fù)p傷程度的方法。本發(fā)明在于建立了一種及時的華貴櫛孔扇貝低溫?fù)p傷判斷標(biāo)準(zhǔn)，通過對華貴櫛孔扇貝的消化腺和閉殼肌分別進(jìn)行脂肪和糖原含量的檢測，比對損傷程度判斷標(biāo)準(zhǔn)，低溫一級損傷：消化腺脂肪的含量≤40％且閉殼肌糖原的含量≤15mg/g；低溫二級損傷：消化腺脂肪的含量≤45％且閉殼肌糖原的含量≤20mg/g，同時高于一級損傷標(biāo)準(zhǔn)；低溫未損傷：消化腺的脂肪含量45％或者閉殼肌的糖原含量20mg/g。本方法可以通過脂肪和糖原含量的檢測，判斷華貴櫛孔扇貝是否處于低溫?fù)p傷以及處于何種程度的低溫?fù)p傷狀態(tài)，及時判斷育種所需親貝受到的低溫?fù)p傷程度，為耐低溫品種的培育提供支持。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種判斷貝類低溫?fù)p傷程度的方法，屬于貝類育種領(lǐng)域，特別涉及一種判斷華貴櫛孔扇貝低溫?fù)p傷程度的方法。

背景技術(shù)

華貴櫛孔扇貝(Chlamys?nobilis?Reeve)隸屬軟體動物門、瓣鰓綱、珍珠貝目、扇貝科，為暖水性海洋貝類，廣泛分布在我國的東南沿海、泰國、越南、印度尼西亞以及日本。因其有生長快、養(yǎng)殖周期短、經(jīng)濟(jì)效益高等優(yōu)勢而廣受養(yǎng)殖戶的青睞，上世紀(jì)80年代就已在福建、廣東、廣西、海南等大規(guī)模養(yǎng)殖，成為我國南方最重要的海水養(yǎng)殖貝類之一，為我國海水養(yǎng)殖業(yè)帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)效益。由于華貴櫛孔扇貝為暖水性貝類，其養(yǎng)殖過程中冬季時常會出現(xiàn)大規(guī)模死亡，給養(yǎng)殖業(yè)者帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失。因此，培育出耐低溫的新品種已成為華貴櫛孔扇貝養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的迫切需要。

低溫脅迫貝類的研究一直都有報道，但沒有關(guān)于判定低溫?fù)p傷程度的方法報道。我們前期在華貴櫛孔扇貝低溫脅迫的研究中通常采用觀察外套膜皺縮情況以及鰓的損傷情況來判斷其損傷程度，但當(dāng)觀察到這種肉眼可見的損傷時，扇貝已經(jīng)處于低溫應(yīng)激的后期，此時進(jìn)行回溫養(yǎng)殖，扇貝也很難恢復(fù)活力，不能夠再作為耐低溫品種培育中的親貝。因此，尋找一種能夠及時判斷扇貝低溫?fù)p傷程度的方法對培育耐低溫新品種具有重要意義。

然而，迄今為止，還沒有判斷貝類低溫?fù)p傷程度的報道，為其耐低溫品種培育服務(wù)。

發(fā)明內(nèi)容

為了克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明目的是提供一種通過檢測機(jī)體組織脂肪含量和糖原含量，及時判斷華貴櫛孔扇貝低溫?fù)p傷程度的方法，以解決現(xiàn)有肉眼觀察存在的判斷低溫?fù)p傷不及時的問題。

為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：

本發(fā)明提供一種判斷華貴櫛孔扇貝低溫?fù)p傷程度的方法，根據(jù)華貴櫛孔扇貝機(jī)體組織的脂肪含量和糖原含量進(jìn)行判斷。

低溫引起的冷損傷反應(yīng)是一個耗能過程，脂肪和糖原作為生物體內(nèi)重要的能源物質(zhì)，它們的分解能夠保證生命的正常活動。1g脂肪完全氧化分解后釋放熱量約9千卡，是相同質(zhì)量的蛋白和碳水化合物的2倍，因此脂肪是一種高效的能源物質(zhì)，飼料中脂質(zhì)的添加還能起到節(jié)約蛋白質(zhì)的作用。除了提供能量外，脂類物質(zhì)還在生物體內(nèi)具有多種生物學(xué)功能，其中固醇脂可以用來合成維生素D、性激素和蛻殼激素等，而磷脂和糖脂等還是構(gòu)成生物膜的主要成分，變溫動物在不同的環(huán)境損傷如溫度、鹽度的變化時，通常通過調(diào)節(jié)細(xì)胞膜中不飽和脂肪酸的含量來維持細(xì)胞膜的流動性。除了為機(jī)體提供能量，糖原還可分解轉(zhuǎn)化為甘油、海藻糖、葡萄糖等小分子碳水化合物，通過葡萄糖分解產(chǎn)生ATP的方式為機(jī)體提供能量抵御寒冷。

脂肪和糖原對華貴櫛孔扇貝的生命活動非常重要。由于低溫能夠影響脂肪和糖原的代謝，因此通過檢測機(jī)體組織中脂肪含量和糖原含量的變化能夠及時地判斷華貴櫛孔扇貝的低溫?fù)p傷程度。因此，本發(fā)明提供了一種通過檢測機(jī)體組織中脂肪含量和糖原含量的變化來及時判斷華貴櫛孔扇貝低溫?fù)p傷程度的方法。

進(jìn)一步地，所述判斷華貴櫛孔扇貝低溫?fù)p傷程度的方法包括以下步驟：

(1)樣品獲得：選取低溫脅迫后的扇貝，取樣消化腺和閉殼肌；

(2)脂肪含量檢測：測定消化腺組織中脂肪含量，利用氯仿-甲醇法、傳統(tǒng)索氏抽提法或脂肪儀測定法中的一種；