[發明專利]類風濕因子IgG、IgM、IgA復合質控品及其制備方法、應用

有效

• 申請號: 202110474091.2
• 申請日: 2021-04-29
• 公開（公告）號: CN113234154B
• 公開（公告）日: 2022-04-08
• 發明（設計）人: 陳鑫;潘敬梅;秦楓;黃敬雙;曹長春;王健;張小飛;顏松;周玥;張偉
• 申請（專利權）人: 四川攜光生物技術有限公司
• 主分類號: C07K16/18
• 分類號: C07K16/18;G01N33/68
• 代理公司: 成都行之專利代理事務所(普通合伙) 51220
• 代理人: 唐邦英

1.類風濕因子IgG、IgM、IgA復合質控品的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1、分別獲取小鼠RF抗體的可變區基因序列、人IgM恒定區基因序列和人IgA恒定區基因序列，小鼠RF抗體的可變區基因序列如SEQ ID No.2所示，其氨基酸序列如SEQ ID No.4所示；

S2、根據步驟S1獲得的基因序列按以下排序順序合成全基因序列：

小鼠RF抗體的可變區基因序列-Linker-人IgA恒定區基因序列-Linker-人IgM-恒定區基因序列；獲得的全基因序列如SEQ ID No.1所示，其氨基酸序列如SEQ ID No.3所示；

S3、將步驟S2獲得的全基因序列引入含有人IgG Fc片段基因表達序列的pFUSE-hIgG1-Fc2載體中，制備同時含有人IgG、人IgM、人IgA Fc段和小鼠RF抗體可變區的重組質粒；

S4、將步驟S3獲得的重組質粒轉染哺乳細胞，獲取同時含有人IgG、人IgM、人IgA Fc段和小鼠RF抗體可變區的重組抗體。

2.根據權利要求1所述的類風濕因子IgG、IgM、IgA復合質控品的制備方法，其特征在于，步驟S2中，全基因序列的合成過程如下：

針對小鼠RF抗體的可變區基因序列、人IgM恒定區基因序列和人IgA恒定區基因序列，插入剛性linker連接，在小鼠RF抗體的可變區基因序列的N端加入蜂毒信號肽序列，在序列上游加入限制性核酸內切酶位點EcoRI，下游序列插入限制性核酸內切酶位點NcoI。

3.根據權利要求1所述的類風濕因子IgG、IgM、IgA復合質控品的制備方法，其特征在于，步驟S4中采用的哺乳細胞為HEK293哺乳細胞。

4.根據權利要求1所述的類風濕因子IgG、IgM、IgA復合質控品的制備方法，其特征在于，還包括以下步驟：

將獲得的同時含有人IgG、人IgM、人IgA Fc段和小鼠RF抗體可變區的重組抗體制備成緩沖溶液。

5.如權利要求1-4任一項所述的制備方法制備的同時含有人IgG、人IgM、人IgA Fc段和小鼠RF抗體可變區的重組抗體。

6.一種類風濕因子IgG、IgM、IgA復合質控品，其特征在于，包括如權利要求1-4任一項所述的制備方法制備的同時含有人IgG、人IgM、人IgA Fc段和小鼠RF抗體可變區的重組抗體。

7.根據權利要求6所述的一種類風濕因子IgG、IgM、IgA復合質控品，其特征在于，由含有重組抗體的緩沖液配制而成。

8.如權利要求1-4任一項所述的制備方法在制備同時含有人IgG、人IgM、人IgA Fc段和小鼠RF抗體可變區的重組抗體中的應用。

9.如權利要求1-4任一項所述的制備方法在制備抗類風濕因子抗體IgG檢測試劑盒、抗類風濕因子抗體IgG檢測試劑盒、抗類風濕因子抗體IgA檢測試劑盒和抗類風濕因子抗體IgA/G/M 檢測試劑盒中的應用。