[發明專利]一種蠟樣芽孢桿菌免疫膠體金快速檢測試紙條及其制備方法

在審

• 申請號: 202110472002.0
• 申請日: 2021-04-29
• 公開（公告）號: CN113341137A
• 公開（公告）日: 2021-09-03
• 發明（設計）人: 王英林;張聞桐;劉程;方水琴;田亞晨;吳美嬌;吳有雪;劉濤;楊昊;李斌;吳婭芳;姜嘉燁;黃笑天;劉箐
• 申請（專利權）人: 上海理工大學
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569;G01N33/577;G01N33/58;G01N33/558;G01N33/532;B22F9/24;B22F1/00;B82Y40/00;B82Y30/00
• 代理公司: 上海邦德專利代理事務所(普通合伙) 31312
• 代理人: 王文娟

1.一種蠟樣芽孢桿菌免疫膠體金快速檢測試紙條，其特征在于，包括：

PVC底板、設置于所述PVC底板上的樣品墊(14)、與所述樣品墊(14)相鄰設置的結合墊(13)及與所述結合墊(13)相鄰設置的吸水墊(11)；

所述結合墊(13)與PVC底板之間設置有硝酸纖維素膜層(12)；

所述結合墊上設置有檢測線(16)與質控線(15)。

2.如權利要求1所述的一種蠟樣芽孢桿菌免疫膠體金快速檢測試紙條，其特征在于，所述檢測線(16)及質控線(15)設置于所述硝酸纖維素膜層(12)上，且檢測線(16)靠近樣品墊(14)，質控線(15)靠近吸水墊(11)。

3.如權利要求1所述的一種蠟樣芽孢桿菌免疫膠體金快速檢測試紙條，其特征在于，所述檢測線(16)和結合墊(13)上膠體金偶聯的單克隆體抗體，其單克隆抗體由保藏號為2B9的雜交瘤細胞株分泌產生，所述質控線(15)由羊抗鼠抗體構成。

4.如權利要求3所述的一種蠟樣芽孢桿菌免疫膠體金快速檢測試紙條，其特征在于，所述與膠體金偶聯的單克隆體抗體中的制備的膠體金粒徑為30-40nm，膠體金與單抗的質量體積比為36μg/mL，膠體金偶聯抗體和構成檢測線(16)的抗體為同一單克隆抗體。

5.如權利要求1所述的一種蠟樣芽孢桿菌免疫膠體金快速檢測試紙條的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1、進行膠體金的制備；

S2、確定膠體金標記抗體最優pH；

S3、確定膠體金偶聯抗體的最佳結合量；

S4、對抗體進行膠體金標記；

6.如權利要求5所述的一種蠟樣芽孢桿菌免疫膠體金快速檢測試紙條的制備方法，其特征在于，所述步驟S1包括：

S11、取氯金酸粉末加入滅過菌的雙蒸水，配成氯金酸溶液；

S12、取二合水檸檬酸三鈉，溶解到，雙蒸水中配成檸檬酸三鈉溶液，現配現用；

S13、雙蒸水的燒瓶中，調節磁力攪拌器溫度到150℃，攪拌速率為500rpm，加熱至沸騰，立即加入氯金酸，沸騰15s，充分攪拌同時迅速加入1％的檸檬酸三鈉，停止加熱，冷卻至室溫，分裝后避光保存。