[發明專利]一種測定蔬菜中硒形態含量的方法

有效

• 申請號: 202110470129.9
• 申請日: 2021-04-28
• 公開（公告）號: CN113189233B
• 公開（公告）日: 2023-03-10
• 發明（設計）人: 魏益華;張金艷;戴廷燦;邱素艷;涂田華
• 申請（專利權）人: 江西省農業科學院農產品質量安全與標準研究所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/14;G01N30/30;G01N30/32;G01N30/34;G01N30/74;G01N30/86;G01N21/64
• 代理公司: 北京三聚陽光知識產權代理有限公司 11250
• 代理人: 張琳琳

1.一種測定蔬菜中硒形態含量的方法，其特征在于，所述方法使用離子對反相高效液相色譜-紫外-氫化物發生-原子熒光光譜法測試待測樣品中的硒代胱氨酸、甲基硒代半胱氨酸、硒脲、硒代蛋氨酸、硒代乙硫氨酸、亞硒酸根和硒酸根7種硒形態和含量；

包括如下步驟：

S1：取1份待測樣品加入碘乙酰胺溶液，使用超聲波提取后過濾上機測試，測定亞硒酸根的形態和含量；

S2：取另外1份待測樣品，加入水后超聲破壁，再加入蛋白酶使用超聲波提取后過濾上機測試，測定除亞硒酸根以外硒的形態和含量；

步驟S1和S2中所述上機測試的儀器分析測試條件為：

液相色譜條件： C18 反相色譜柱，250×4.6 mm，5μm，流動相為30 mmol/L磷酸氫二銨溶液，其中含有0.5 mmol/L四丁基溴化銨，同時含有2%甲醇，pH為6.0，流速為1.2 mL/min，進樣量為100 μL，柱溫為35℃；

紫外條件：紫外燈功率40 w，長度28 cm，在線紫外消解；

氫化物發生條件：0.35％氫氧化鉀+0.05％碘化鉀，0.35％氫氧化鉀+1.5％硼氫化鉀，10％鹽酸，泵轉速60 r/min；

原子熒光光譜條件：負高壓300 V，燈總電流80 mA，載氣流量300 mL/min，屏蔽氣流量500 mL/min，原子化器高度9 mm；

步驟S2中所述蛋白酶為蛋白酶K，其與所述待測樣品質量比為1：30-1：40；

所述超聲破壁的功率為60-90 w，時間為60-90s；

步驟S1中碘乙酰胺的濃度為1-5mmol/L；

步驟S1和S2中所述超聲提取的頻率為20 kHz頻率超聲，溫度為50-60℃，時間為30min，重復2次。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟S1和步驟S2中，所述過濾包括將經超聲波提取后的溶液使用濾紙過濾定容，濾液再經超濾離心管離心凈化，最后過膜取溶液液體。

3.根據權利要求2所述的方法，所述定容體積為10-25 mL；

所述膜為尼龍濾膜，孔徑為0.45 μm。

4.根據權利要求1-3任一項所述的方法，其特征在于，步驟S1和S2中，所述待測樣品為表面用純水沖洗干凈/擦干、經過勻漿機勻漿1-2min后的蔬菜，所述待測樣品每一份的質量為0.5-5 g。