[發明專利]一種具有校準功能的microRNA檢測試劑盒

在審

• 申請號: 202110467757.1
• 申請日: 2021-04-28
• 公開（公告）號: CN113151413A
• 公開（公告）日: 2021-07-23
• 發明（設計）人: 胡騰杰;周秋梅;程丹丹
• 申請（專利權）人: 杭州覓因生物科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/6851
• 分類號: C12Q1/6851;C12Q1/6886
• 代理公司: 杭州知見專利代理有限公司 33295
• 代理人: 趙越劍

1.一種具有校準功能的microRNA檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒的組成至少包括RT反應液、PCR反應液、RT酶、PCR酶、參考品、空白對照及引物板；所述參考品為2-4次凍融處理后microRNA穩定表達的混合人血清。

2.根據權利要求1所述的一種具有校準功能的microRNA檢測試劑盒，其特征在于，所述凍融處理的冷凍溫度為-15至-80℃。

3.根據權利要求1所述的一種具有校準功能的microRNA檢測試劑盒，其特征在于，所述RT反應液包含：RT預混液5×20％-45％，濃度30-150nM的特異性RT引物，濃度1-4mM的dNTP，濃度5-20mM的MgCL₂，其余為無核酸酶水。

4.根據權利要求1所述的一種具有校準功能的microRNA檢測試劑盒，其特征在于，所述PCR反應液包含：PCR預混液10×20％，濃度2-8mM的MgCL₂，其余為無核酸酶水。

5.根據權利要求1所述的一種具有校準功能的microRNA檢測試劑盒，其特征在于，所述RT酶為逆轉錄酶；所述PCR酶為DNA聚合酶。

6.根據權利要求1所述的一種具有校準功能的microRNA檢測試劑盒，其特征在于，所述空白對照為無核酸酶水。

7.根據權利要求1所述的一種具有校準功能的microRNA檢測試劑盒，其特征在于，所述引物板為384孔板或96孔板，引物板上具有檢測靶標的正反引物干粉。

8.一種具有校準功能的胃癌檢測用microRNA檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒的組成包括RT反應液、PCR反應液、RT酶、PCR酶、參考品、陽性質控品、陰性質控品、空白對照及引物板；

所述RT反應液包含：RT預混液5×20％-45％，濃度30-150nM的12個靶標特異性RT引物，濃度1-4mM的dNTP，濃度5-20mM的MgCL₂，其余為無核酸酶水；

所述PCR反應液包含：PCR預混液10×20％，濃度2-8mM的MgCL₂，其余為無核酸酶水；所述RT酶為逆轉錄酶，濃度為100U/ul-300U/ul；

所述PCR酶為DNA聚合酶，濃度為2U/ul-10U/ul；

所述空白對照為無核酸酶水；

所述參考品為2-4次凍融處理后microRNA穩定表達的混合人血清。

9.根據權利要求8所述的一種具有校準功能的胃癌檢測用microRNA檢測試劑盒，其特征在于，所述靶標包括hsa-miR-29c-3p、hsa-miR-424-5p、hsa-miR-103a-3p、hsa-miR-93-5p、hsa-miR-181a-5p、hsa-miR-21-5p、hsa-miR-140-5p、hsa-miR-30e-5p、hsa-miR-142-5p、hsa-miR-126-3p、hsa-miR-183-5p及hsa-miR-340-5p。

10.根據權利要求8所述的一種具有校準功能的胃癌檢測用microRNA檢測試劑盒，其特征在于，所述陽性質控品為含12種靶標microRNA的混合RNA溶液；所述陰性質控品為不含12種靶標microRNA的混合RNA溶液；所述引物板為384孔板，引物板上含檢測靶標的正反引物干粉。