[發明專利]一種靶向篩選茅蒼術抗乳腺癌活性成分的方法

在審

• 申請號: 202110460741.8
• 申請日: 2021-04-27
• 公開（公告）號: CN113274420A
• 公開（公告）日: 2021-08-20
• 發明（設計）人: 劉明;楊藝娜;郭偉強
• 申請（專利權）人: 蘇州科技大學
• 主分類號: A61K36/284
• 分類號: A61K36/284;A61P35/00;A61P15/14;G01N30/02;G01N30/72;A61K125/00
• 代理公司: 北京化育知識產權代理有限公司 11833
• 代理人: 秦麗

本發明涉及一種靶向篩選茅蒼術抗乳腺癌活性成分的方法，包括以下步驟：以茅蒼術或茅蒼術粗提取物為原料采用細胞膜色譜法提取活性成分。采用該方法提取茅蒼術抗乳腺癌活性成分，該方法具有靈敏度高、特異性強、快速等優點，適用于天然來源的混合成分中的抗腫瘤潛在活性成分的篩選。

技術領域

本發明屬于細胞生物學、天然產物化學、分析化學領域，尤其涉及一種靶向篩選茅蒼術抗乳腺癌活性成分的方法。

背景技術

癌癥，因其高發病率和高死亡率，嚴重危害人民群眾的身心健康。僅以乳腺癌為例，我國每年大約新增乳腺癌患者27.9萬例，位居女性腫瘤發病率首位。其中三陰性乳腺癌(triple-negative breast cancer，TNBC)占所有乳腺癌的15-20％，并由于組織分級高，易產生遠端轉移，且缺乏除傳統手術、放化療外的有效治療藥物，而成為病死率最高的一類乳腺癌亞型。天然藥物在癌癥治療中做出巨大的貢獻，在抗癌藥物中的占比高達27％左右，如紫杉醇、多西他賽、長春瑞濱、欖香烯等等。雖然，已發現諸多具有抗腫瘤活性的成分，但其作用機制和抑制靶點的研究存在極大的不足。因此，急需建立一種可特定靶向篩選抗乳腺癌潛在藥物的方法。

細胞膜色譜(cell membrane chromatography，CMC)是一種基于親和層析原理而衍生的新型色譜技術。其具有較好的色譜分離能力，還兼顧了操作的簡便性及靈敏性。但值得注意的是，其制備工藝和方式是其能否完成篩選分離工作的關鍵之一。目前，其制備流程因所需耦合的細胞的類型和來源而呈現差異化。目前，尚未有針對乳腺癌細胞系的細胞膜色譜柱的耦合制備工藝。

茅蒼術屬菊科植物，以江蘇省茅山地區為道地產地。其藥用歷史悠久，最早記載于《神農本草經》，被列為上品，具有燥濕健脾、祛風散寒、明目的功效，味辛、苦、性溫。蒼術化學成分主要類型為倍半萜類、聚炔類、芳香苷類等，現代藥理活性研究表明，蒼術具有促進胃腸道蠕動、抗潰瘍、抗腫瘤等作用。雖然，茅蒼術抗腫瘤作用已被證實，但其抗腫瘤活性成分以及對某種特定腫瘤的防治效果如何尚不清楚，仍需深入研究。

發明內容

鑒于現有技術所存在的問題，本發明提供一種靶向篩選茅蒼術抗乳腺癌活性成分的方法，該方法將特定乳腺癌細胞，與硅膠結合，裝柱，經高效液相、質譜檢測，篩選具有抗乳腺癌作用的活性成分，該方法具有靈敏度高、特異性強、快速等優點，適用于天然來源的混合成分中的抗腫瘤潛在活性成分的篩選。

本發明解決上述技術問題的技術方案如下：

一種靶向篩選茅蒼術抗乳腺癌活性成分的方法，包括以下步驟：以茅蒼術或茅蒼術粗提取物為原料采用細胞膜色譜法提取活性成分。

采用上述技術方案的有益效果包括：本發明使用細胞膜色譜柱，將茅蒼術的分離與抗腫瘤檢測相結合，實現了茅蒼術抗腫瘤活性成分的一次性的“精準”靶向分離和鑒定，具有靈敏度高、特異性強、快速，適用于乳腺癌抑制劑的篩選等優點，適用于天然來源的混合成分中的抗腫瘤潛在活性成分的篩選。

進一步，還包括將以茅蒼術為原料采用細胞膜色譜法提取的活性成分進行檢測的步驟，檢測的步驟包括高效液相檢測和/或質譜檢測。

采用上述技術方案的有益效果包括：通過上述的高效液相檢測和/或質譜檢測可以進一步確定活性成分。

進一步，高效液相檢測的條件包括：采用C18柱，流動相為甲醇和水，檢測波長為203nm，柱溫為30℃，流速為1.0ml/min。

和/或質譜檢測的條件包括：電離方式EI，電子能量70eV，離子源溫度230℃，四極桿溫度150℃，調諧方式為標準調諧，掃描范圍為10-500amu，電子倍增器電壓1341V。

采用上述技術方案的有益效果包括：減少茅蒼術中有效成分的分離工藝和流程；縮短茅蒼術有效成分的分離時間；將茅蒼術有效成分的分離、功能發現和結構鑒定有機結合，精準篩選茅蒼術中潛在抗腫瘤活性成分。