[發(fā)明專利]一種靶向篩選茅蒼術抗乳腺癌活性成分的方法

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• 申請日: 2021-04-27
• 公開（公告）號: CN113274420A
• 公開（公告）日: 2021-08-20
• 發(fā)明（設計）人: 劉明;楊藝娜;郭偉強
• 申請（專利權）人: 蘇州科技大學
• 主分類號: A61K36/284
• 分類號: A61K36/284;A61P35/00;A61P15/14;G01N30/02;G01N30/72;A61K125/00
• 代理公司: 北京化育知識產權代理有限公司 11833
• 代理人: 秦麗

1.一種靶向篩選茅蒼術抗乳腺癌活性成分的方法，其特征在于，包括以下步驟：以茅蒼術或茅蒼術粗提取物為原料采用細胞膜色譜法提取活性成分。

2.根據(jù)權利要求1所述一種靶向篩選茅蒼術抗乳腺癌活性成分的方法，其特征在于，還包括將以茅蒼術為原料采用細胞膜色譜法提取的活性成分進行檢測的步驟，檢測的步驟包括高效液相檢測和/或質譜檢測。

3.根據(jù)權利要求2所述一種靶向篩選茅蒼術抗乳腺癌活性成分的方法，其特征在于，高效液相檢測的條件包括：采用C18柱，流動相為甲醇和水，檢測波長為203nm，柱溫為30℃，流速為1.0ml/min；和/或質譜檢測的條件包括：電離方式EI，電子能量70eV，離子源溫度230℃，四極桿溫度150℃，調諧方式為標準調諧，掃描范圍為10-500amu，電子倍增器電壓1341V。

4.根據(jù)權利要求1-3任一項所述一種靶向篩選茅蒼術抗乳腺癌活性成分的方法，其特征在于，以茅蒼術或茅蒼術粗提取物為原料采用細胞膜色譜法提取活性成分包括以下步驟：用乳腺癌細胞制備細胞膜色譜柱，加入茅蒼術粗提取物，使用去離子水洗滌，隨后采用pH3.3的50％甲醇溶液進行洗脫，收集洗脫液。

5.根據(jù)權利要求1-3任一項所述一種靶向篩選茅蒼術抗乳腺癌活性成分的方法，其特征在于，在細胞膜色譜法中，細胞膜色譜柱的裝柱方法為濕法裝柱法，包括以下步驟：將細胞膜懸液測定蛋白含量，按蛋白含量：硅膠粉10mg：1g的比例，向細胞膜懸液中加入硅膠粉，攪拌均勻后靜置過夜，濕法裝柱得到用于篩選茅蒼術抗乳腺癌活性成分的色譜柱。

6.根據(jù)權利要求1-3任一項所述一種靶向篩選茅蒼術抗乳腺癌活性成分的方法，其特征在于，在細胞膜色譜法中，采用的細胞膜為乳腺癌細胞的細胞膜，優(yōu)選的，采用的細胞膜為乳腺癌細胞MCF-7的細胞膜。

7.根據(jù)權利要求1-3任一項所述一種靶向篩選茅蒼術抗乳腺癌活性成分的方法，其特征在于，細胞膜色譜法中，細胞膜的制備方法包括以下步驟：收集細胞懸液1000g 4℃離心10min，棄上清，得到細胞沉淀；生理鹽水清洗細胞沉淀2-3遍，加入50mM Tris-Hcl，超聲30min破碎細胞；將懸液于1000g 4℃離心5min，細胞膜懸浮在上清液中，收集上清液于12000g 4℃離心20min，所得沉淀即為細胞膜。

8.根據(jù)權利要求1-3任一項所述一種靶向篩選茅蒼術抗乳腺癌活性成分的方法，其特征在于，茅蒼術粗提取物為茅蒼術的乙醇提取物；粗提取物與細胞膜色譜法過程中使用的細胞膜的蛋白含量的質量比為1g：10mg。

9.根據(jù)權利要求8所述一種靶向篩選茅蒼術抗乳腺癌活性成分的方法，其特征在于，茅蒼術的粗提取物的制備方法包括以下步驟：取茅蒼術干燥根莖，打粉后過40目篩，用10倍量的90％乙醇，50℃超聲提取多次，每次40分鐘，提取液抽濾后混合，濃縮獲得浸膏，即為茅蒼術的粗提取物。

10.茅蒼術活性成分在制備預防和/或治療乳腺癌藥物中的應用，其特征在于，茅蒼術活性成分采用權利要求1-9任一項所述方法制備。