[發(fā)明專利]一種利用魔芋花粉離體培養(yǎng)獲得單倍體植株的方法有效

申請?zhí)枺?/td>	202110459770.2	申請日：	2021-04-27
公開（公告）號：	CN113100063B	公開（公告）日：	2022-03-22
發(fā)明（設計）人：	段龍飛;覃劍鋒;蔡陽光;郭邦利;陳國愛	申請（專利權）人：	安康市農業(yè)科學研究院
主分類號：	A01H4/00	分類號：	A01H4/00
代理公司：	西安研創(chuàng)天下知識產權代理事務所(普通合伙) 61239	代理人：	梁寶龍
地址：	725021***	國省代碼：	陜西;61
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摘要：
搜索關鍵詞：	一種利用魔芋花粉培養(yǎng) 獲得單倍體植株方法
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【說明書】：

本發(fā)明公開了一種利用魔芋花粉離體培養(yǎng)獲得單倍體植株的方法，包括以下步驟：S1、選擇4齡優(yōu)質開花花魔芋，在花藥未散粉前取下雄花段，將雄花段在2～6℃下預處理1～2天，消毒處理得到消毒雄花段；S2、催粉和花粉愈傷組織誘導：將消毒雄花段，在無菌條件下切割成小段，接種到愈傷組織誘導培養(yǎng)基中誘導培養(yǎng)，使雄花散粉，利用暗培養(yǎng)?光培養(yǎng)手段培養(yǎng)2個周期，得到愈傷組織；S3、分化培養(yǎng)：在無菌條件下，將愈傷組織轉入分化培養(yǎng)基中，采用白光?紅藍光手段培養(yǎng)5個周期，即得到魔芋組培苗。本發(fā)明提供的培養(yǎng)方法保證了花粉的成活率，解決了花粉消毒難的問題，且提高愈傷組織的分化率，縮短了成苗的時間。

技術領域

本發(fā)明屬于農業(yè)栽培技術技術領域，具體涉及一種利用魔芋花粉離體培養(yǎng)獲得單倍體植株的方法。

背景技術

魔芋為天南星科多年生草本植物，內含大量可溶性膳食纖維葡甘聚糖，是人體第七大營養(yǎng)素，為聯(lián)合國確定的十大保健食品，對降三高、減肥、通便等具有顯著效果。魔芋種質資源豐富，全世界約有170種，我國有21種。然而人工栽培利用仍以為花魔芋為主，而且多為地方群體種，品種退化，品質下降、抗病性減弱。因此，加快魔芋抗病新品種的選育，成為當前魔芋產業(yè)發(fā)展中急需解決的問題。

然而，魔芋具高度雜合，遺傳背景復雜，因而難以通過傳統(tǒng)方法得到純合自交系，導致魔芋育種受到極大限制；1990年，孔凡倫等人利用白魔芋未授粉子房離體培養(yǎng)獲得單倍體植株，截止目前，國內外而對魔芋花粉、花藥、胚珠等誘導單倍體的研究尚未見任何報道。由于花粉是單倍體細胞，誘發(fā)它經愈傷組織或胚狀體發(fā)育而成的植株都是單倍體，且不受花藥的藥隔、藥壁等體細胞的干擾。因此，利用花粉離體培養(yǎng)技術在魔芋單倍體育種中意義重大。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的在于克服現有技術的不足，提供一種利用魔芋花粉離體培養(yǎng)獲得單倍體植株的方法。

為實現上述目的，本發(fā)明采用的技術方案是：

一種利用魔芋花粉離體培養(yǎng)獲得單倍體植株的方法，包括以下步驟：

S1、魔芋雄花獲得及消毒處理：

S11、選擇4齡優(yōu)質開花花魔芋，在花藥未散粉前取下雄花段，將雄花段在2～6℃下預處理1～2天，得到預處理雄花段；

S12、將步驟S11得到的預處理雄花段進行消毒處理，消毒完成后，干燥，得到消毒雄花段；

S2、催粉和花粉愈傷組織誘導：

將步驟S12得到的消毒雄花段，在無菌條件下切割成小段，將小段接種到愈傷組織誘導培養(yǎng)基中誘導培養(yǎng)3～5天，使雄花散粉，然后利用暗培養(yǎng)-光培養(yǎng)手段培養(yǎng)2個周期，得到愈傷組織；

S3、分化培養(yǎng)：

在無菌條件下，將步驟S2得到的愈傷組織轉入分化培養(yǎng)基中，采用白光-紅藍光手段培養(yǎng)5個周期，即得到魔芋組培苗；

上述步驟S2中誘導培養(yǎng)、暗培養(yǎng)-光培養(yǎng)環(huán)節(jié)以及步驟S3分化培養(yǎng)環(huán)節(jié)均在密閉培養(yǎng)容器中進行。