[發明專利]一種人臍帶間充質干細胞制劑及其應用

在審

• 申請號: 202110455279.2
• 申請日: 2021-04-26
• 公開（公告）號: CN113197917A
• 公開（公告）日: 2021-08-03
• 發明（設計）人: 張京鐘;余爽;杜方舟
• 申請（專利權）人: 蘇州京賽諾生物科技有限公司
• 主分類號: A61K35/28
• 分類號: A61K35/28;A61K49/00;A61P3/10;A61P17/02;C12N5/10;C12N15/867;C12N15/65
• 代理公司: 蘇州知途知識產權代理事務所(普通合伙) 32299
• 代理人: 孫占莉

本發明提供了一種人臍帶間充質干細胞制劑及其應用；所述細胞制劑借助纖維蛋白凝膠作為細胞移植時的支架，為hUC?MSCs細胞提供更利于存活的三維環境，有利于其長時間發揮促修復作用。本發明還涉及帶有綠色熒光標記的人間充質干細胞及其應用。具體的通過采用EGFP對hUC?MSCs進行標記，實現了移植細胞在體內的示蹤及作用機制的探索。并且采用EGFP對hUC?MSCs驗證了本發明提供的hUC?MSCs細胞制劑能夠顯著加速糖尿病創面的愈合，促進再上皮化。

技術領域

本申請屬于干細胞應用技術領域，尤其是涉及一種人臍帶間充質干細胞制劑及其應用；還涉及一種帶有綠色熒光標記的人間充質干細胞及其應用。

背景技術

糖尿病是一種慢性代謝性疾病，其發病率正逐年增加，現階段影響著全球9.5％的人群，預計到2030年，影響的人數或將突破全球人口的50％。糖尿病足潰瘍(Diabetic footulceration,DFU)是糖尿病的主要并發癥之一，國際糖尿病足工作組(The InternationalWorking Group on the Diabetes Foot,IWGDF)將其定義為糖尿病患者足踝以下的全層皮膚損傷，這種損傷與糖尿病神經病變和周圍動脈疾病相關。

據估計，平均每30s全球就有一個人因為糖尿病足導致截肢(參見Boulton AJ,Vileikyte L,Ragnarson-Tennvall G,Apelqvist J(2005).Lancet(London,England)366(9498):1719-1724.)。然而，局部的缺血、感染、神經病變和代謝紊亂會延遲足部傷口愈合，這對患者和臨床醫生來說都是治療糖尿病足所面臨的嚴峻挑戰。糖尿病足不僅僅是醫學問題，更是社會問題和經濟問題。糖尿病足嚴重影響患者的生活質量乃至生命，同時治療費用及相關社會經濟問題給個人和國家帶來沉重負擔。

傷口愈合是一個動態的復雜過程，包括止血、炎癥、增生、重塑四個重疊階段，糖尿病傷口愈合是一個重要的問題，傷口的形成和外周血管疾病、創傷、感染和神經并發癥之間互相交叉，所以DFU常發生在缺血、感染、神經病變和代謝紊亂的環境中，導致傷口愈合不良和治療方案不佳(參見Bakker K,Apelqvist J,Lipsky BA,Van Netten JJ(2016)Diabetes/metabolism research and reviews 32Suppl 1:2-6.)。目前臨床上傳統干預糖尿病足的方法包括控制血糖、傷口局部反復清創、抗感染、改善下肢血供、持續負壓吸引、高壓氧干預等，對于下肢缺血嚴重的糖尿病足患者則采用下肢動脈腔內介入或下肢動脈旁路移植手術進行下肢血流重建(參見Lipsky BA,et al.(2016).Diabetes/metabolismresearch and reviews 32Suppl 1:45-74.和Lopes L,et al.(2018).Stem Cell ResTher 9(1):188.)，但以上各種方法均不能達到徹底治愈這一預期效果。

近年來，干細胞移植治療糖尿病足的應用越來越廣泛，移植后的干細胞能夠促進新生血管的形成，改善和恢復肢體血流，改善缺血屏障。可用于移植的干細胞主要來源有骨髓、外周血、臍帶血、臍帶組織和脂肪，根據來源，可以將干細胞分成單核細胞(mononuclearcells,MNCs)、內皮祖細胞(endothelial progenitor cells,EPCs)或間充質干細胞(mesenchymal stem cells,MSCs)。間充質干細胞作為干細胞的一個重要分支，其來源于發育早期的中胚層和外胚層，于1976年被Friedenstein首次發現，這些細胞有分化成成骨細胞、軟骨細胞、脂肪細胞、肌肉細胞和神經細胞的潛力。