[發明專利]乳酸脫氫酶測定試劑球的制備方法、試劑球及微流控芯片

有效

• 申請號: 202110454897.5
• 申請日: 2021-04-26
• 公開（公告）號: CN113278675B
• 公開（公告）日: 2023-09-29
• 發明（設計）人: 牟健;汪晨宇;周慧欣;陳明
• 申請（專利權）人: 深圳市錦瑞生物科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/32
• 分類號: C12Q1/32;C12Q1/26
• 代理公司: 深圳市六加知識產權代理有限公司 44372
• 代理人: 孟麗平

本發明實施例涉及醫學檢測技術領域，尤其涉及一種乳酸脫氫酶測定試劑球的制備方法、試劑球及微流控芯片，乳酸脫氫酶測定試劑球包括第一試劑球和第二試劑球，形成第一試劑球的第一試劑液包括：第一緩沖液40?200mmol/L、碘硝基氯化四氮唑藍0.1?10g/L、第一賦形劑10?100g/L和穩定劑0.1?10g/L，形成第二試劑球的第二試劑液包括：第二緩沖液40?200mmol/L、乳酸鹽10?100g/L、氧化型輔酶I：10?50g/L、黃遞酶20?100U/L和第二賦形劑10?100g/L。檢測時，將生成的還原型輔酶I(NADH)進一步反應生成有色穩定的甲臜，從而，可以檢測490nm波長處的吸光度來定量乳酸脫氫酶的濃度，使得靈敏度大幅提高，此外，該劑量范圍的第一賦形劑和第二賦形劑能分別保證第一試劑球和第二試劑球具有較好的形態及復融溶解性，具有較高的穩定性和精密度。

技術領域

本發明實施例涉及醫學檢測技術領域，尤其涉及一種乳酸脫氫酶測定試劑球的制備方法、試劑球及微流控芯片。

背景技術

乳酸脫氫酶廣泛存在于機體中，以肝、腎、心肌、骨骼肌、胰腺和肺等組織中為最多，這些組織中的乳酸脫氫酶的濃度遠高于血清中的乳酸脫氫酶的濃度。所以當少量組織壞死時，壞死組織中的乳酸脫氫酶釋放入血液使得血液中脫酸脫氫酶的濃度升高。因此，臨床上常通過測定乳酸脫氫酶的濃度，以對心梗、肝病和某些惡性腫瘤進行輔助診斷。

目前，臨床上，通常采用L-P速率法測定血清中乳酸脫氫酶的濃度，在L-P速率法中，試劑中的氧化型輔酶I(NAD⁺)會轉化為還原型輔酶I(NADH)，基于乳酸脫氫酶的濃度與還原型輔酶I(NADH)的生成量呈正比，通過監測還原型輔酶I(NADH)的生成量以測定乳酸脫氫酶的濃度。然而，還原型輔酶I(NADH)的活性容易受各種因素的干擾，其自身易被氧化，直接影響乳酸脫氫酶的測定結果，檢測準確性低，靈敏度低。此外，還需依賴大型全自動生化分析儀，難以應用在病人身邊快速診斷，即POCT診斷。雖然，現有用于檢測其它項目的凍干試劑球，但是，現有的凍干試劑球形態較差，難以完全凍干，導致其具有較低的穩定性和準確性。

發明內容

本發明實施例主要解決的技術問題是提供一種乳酸脫氫酶測定試劑球的制備方法、乳酸脫氫酶測定試劑球及微流控芯片，采用該方法制備得到的乳酸脫氫酶測定試劑球具有較高的靈敏度、較好的形態及復融溶解性，同時，還具有較高的穩定性和準確度。

為解決上述技術問題，第一方面，本發明實施例中提供給了一種乳酸脫氫酶測定試劑球的制備方法，所述乳酸脫氫酶測定試劑球包括第一試劑球和第二試劑球；

所述方法包括：

分別配置第一試劑液和第二試劑液；

將所述第一試劑液的液滴滴在液氮中，形成第一冰球，將所述第二試劑液的液滴滴在液氮中，形成第二冰球；

將所述第一冰球冷凍干燥制得所述第一試劑球，將所述第二冰球冷凍干燥制得所述第二試劑球；

其中，所述第一試劑液包括以下組分：第一緩沖液40-200mmol/L、碘硝基氯化四氮唑藍0.1-10g/L、第一賦形劑10-100g/L和穩定劑0.1-10g/L，并且，所述第一試劑液的PH值在第一預設范圍內；

所述第二試劑液包括以下組分：第二緩沖液40-200mmol/L、乳酸鹽10-100g/L、氧化型輔酶I：10-50g/L、黃遞酶20-100U/L和第二賦形劑10-100g/L，并且，所述第二試劑液的PH值在第二預設范圍內。

在一些實施例中，所述配置第一試劑液的步驟包括：

將所述第一緩沖液加入第一預設定量的水中；