[發明專利]乳酸脫氫酶測定試劑球的制備方法、試劑球及微流控芯片

有效

• 申請號: 202110454897.5
• 申請日: 2021-04-26
• 公開（公告）號: CN113278675B
• 公開（公告）日: 2023-09-29
• 發明（設計）人: 牟健;汪晨宇;周慧欣;陳明
• 申請（專利權）人: 深圳市錦瑞生物科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/32
• 分類號: C12Q1/32;C12Q1/26
• 代理公司: 深圳市六加知識產權代理有限公司 44372
• 代理人: 孟麗平

1.一種乳酸脫氫酶測定試劑球的制備方法，其特征在于，所述乳酸脫氫酶測定試劑球包括第一試劑球和第二試劑球；

所述方法包括：

分別配置第一試劑液和第二試劑液；

將所述第一試劑液的液滴滴在液氮中，形成第一冰球，將所述第二試劑液的液滴滴在液氮中，形成第二冰球；

將所述第一冰球冷凍干燥制得所述第一試劑球，將所述第二冰球冷凍干燥制得所述第二試劑球；

其中，所述第一試劑液包括以下組分：第一緩沖液40-200mmol/L、碘硝基氯化四氮唑藍0.1-10g/L、第一賦形劑10-100g/L和穩定劑0.1-10g/L，并且，所述第一試劑液的pH值在第一預設范圍內，所述第一預設范圍為7.0-8.0；

所述第二試劑液包括以下組分：第二緩沖液40-200mmol/L、乳酸鹽10-100g/L、氧化型輔酶I：10-50g/L、黃遞酶20-100U/L和第二賦形劑10-100g/L，并且，所述第二試劑液的pH值在第二預設范圍內，所述第二預設范圍為8.0-9.0。

2.根據權利要求1所述的乳酸脫氫酶測定試劑球的制備方法，其特征在于，所述配置第一試劑液的步驟包括：

將所述第一緩沖液加入第一預設定量的水中；

待所述第一緩沖液在所述水中完全溶解后，加入所述碘硝基氯化四氮唑藍，得到第一溶液，并調節所述第一溶液的pH值至第三預設范圍內，其中，所述第三預設范圍與所述第一預設范圍存在交集，所述第三預設范圍的下限大于所述第一預設范圍的下限，所述第三預設范圍的上限大于所述第一預設范圍的上限；

將所述第一賦形劑和所述穩定劑依次加入所述第一溶液中，得到第二溶液，并調節所述第二溶液的pH值至所述第一預設范圍內，將第二預設定量的水加入所述第二溶液中，得到第三預設定量的所述第一試劑液。

3.根據權利要求1所述的乳酸脫氫酶測定試劑球的制備方法，其特征在于，所述配置第二試劑液的步驟包括：

將所述第二緩沖液加入第一預設定量的水中；

待所述第二緩沖液在所述水中完全溶解后，加入所述乳酸鹽，得到第三溶液，并調節所述第三溶液的pH值至第四預設范圍內，其中，所述第四預設范圍與所述第二預設范圍存在交集，所述第四預設范圍的下限大于所述第二預設范圍的下限，所述第四預設范圍的上限大于所述第二預設范圍的上限；

將所述第二賦形劑加入所述第三溶液中，得到第四溶液，并調節所述第四溶液的pH值至所述第二預設范圍內，依次將所述氧化型輔酶I、所述黃遞酶、第二預設定量的水加入所述第四溶液中，得到第三預設定量的所述第二試劑液。

4.根據權利要求1-3任一項所述的乳酸脫氫酶測定試劑球的制備方法，其特征在于，所述第一緩沖液包括Tris緩沖液，咪唑緩沖液，磷酸鹽緩沖液，二乙醇緩沖液，N-乙酰-D-葡胺緩沖液中的至少一種；和/或，

所述第二緩沖液包括Tris緩沖液，咪唑緩沖液，磷酸鹽緩沖液，二乙醇緩沖液，N-乙酰-D-葡胺緩沖液中的至少一種。

5.根據權利要求1-3任一項所述的乳酸脫氫酶測定試劑球的制備方法，其特征在于，所述穩定劑包括六水氯化鎂，氯化鉀，海藻糖，蔗糖，牛血清白蛋白，螯合劑EDTA中的至少一種。

6.根據權利要求1-3任一項所述的乳酸脫氫酶測定試劑球的制備方法，其特征在于，所述第一賦形劑包括甘露醇，PEG3350，PEG8000，葡聚糖1萬，葡聚糖4萬，水溶性淀粉中的至少一種；和/或，

所述第二賦形劑包括甘露醇，PEG3350，PEG8000，葡聚糖1萬，葡聚糖4萬，水溶性淀粉中的至少一種。

7.一種乳酸脫氫酶測定試劑球，其特征在于，采用如權利要求1-6任意一項所述的乳酸脫氫酶測定試劑球的制備方法制備得到。

8.一種微流控芯片，其特征在于，包括芯片本體和如權利要求7所述的乳酸脫氫酶測定試劑球，其中，所述乳酸脫氫酶測定試劑球設置于所述芯片本體內部。

9.一種生化分析儀，其特征在于，包括分析儀本體、反應槽以及如權利要求8所述的微流控芯片，其中，所述反應槽開設于所述分析儀本體內，所述微流控芯片安裝于所述反應槽。