[發明專利]一種過氧化氫熒光探針及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 202110454150.X
• 申請日: 2021-04-26
• 公開（公告）號: CN113121580B
• 公開（公告）日: 2022-05-06
• 發明（設計）人: 周瑩;楊索;房街芹;賈明軒;王光科
• 申請（專利權）人: 云南大學
• 主分類號: C07F5/02
• 分類號: C07F5/02;C09K11/06;G01N21/64;A61K49/00;A61P35/00
• 代理公司: 北京高沃律師事務所 11569
• 代理人: 馬叢

本發明提供了一種熒光探針及其制備方法和應用，屬于過氧化氫檢測術領域。本發明提供的熒光探針，具有式I所示的結構。本發明提供的熒光探針的分子中含有能夠與過氧化氫發生作用的苯硼酸酯結構，對其它活性氧、活性氮、活性硫等物質具有抗干擾性，對過氧化氫的選擇性高；熒光探針中的苯硼酸酯與過氧化氫反應后斷開并被氧化成羥基，熒光探針的熒光強度相比于與過氧化氫反應前提高了30倍左右，顏色及熒光變化靈敏度高，從而實現了高選擇性、高靈敏度地識別和檢測水體或細胞中的過氧化氫；而且，本發明提供的熒光探針分子穿透細胞的滲透性好，毒性低，可以實現細胞內過氧化氫的熒光檢測；在水體或細胞中的過氧化氫檢測具有良好的應用前景。

技術領域

本發明涉及過氧化氫檢測技術領域，具體涉及一種熒光探針及其制備方法和應用。

背景技術

過氧化氫(H₂O₂)是一種重要活性氧類物質(ROS)，主要產生于細胞線粒體有氧呼吸電子傳遞鏈，它不僅在細胞內的氧化應激反應中扮演著細胞毒物的角色，而且還是重要的信使分子，參與包括傷口愈合、免疫和干細胞增殖等許多病理和生理過程。過氧化氫在細胞內過量積聚會引起生物體代謝紊亂，導致炎癥，衰老，癌癥，糖尿病和神經退行性疾病等一系列疾病產生。同時，過氧化氫和細胞凋亡、細胞增殖等密切相關。因此，過氧化氫檢測與分析技術對于相關疾病的研究具有十分重要的意義。

過氧化氫的檢測主要包括熒光法、光度法、電化學法及化學發光法等。其中，熒光法具有非侵入性、高靈敏性和高信號特異性的特點，應用廣泛。近年來用于檢測過氧化氫的常用的熒光探針大多基于硼酸酯為識別基團。然而，現有的以硼酸酯為識別基團的探針存在受到其它活性氧分子(如過氧亞硝基等)干擾的缺點，對過氧化氫的選擇性不夠高。

發明內容

鑒于此，本發明的目的在于提供一種熒光探針及其制備方法和應用，本發明提供的熒光探針對過氧化氫的選擇性高。

為了實現上述發明目的，本發明提供以下技術方案：

本發明提供了一種熒光探針，具有式I所示的結構：

本發明提供了上述技術方案所述的熒光探針的制備方法，包括以下步驟：

將式II所示的結構的第一化合物、氫化鹽和無水有機溶劑混合進行第一取代反應；將所述第一取代反應得到的反應液與式III所示的結構的第二化合物混合進行第二取代反應，得到式I所示結構的熒光探針；

優選的，所述式II所示的結構的第一化合物由以下方法制備得到：在保護氣氛下，將2,4-二羥基苯甲醛、2-環己烯-1-酮和溶劑混合，進行加成反應，得到式II所示的結構的第一化合物。

優選的，所述2,4-二羥基苯甲醛和2-環己烯-1-酮的摩爾比為1:1；

所述溶劑為水和有機溶劑的混合溶劑；所述有機溶劑包括四氫呋喃、N，N-二甲基甲酰胺；所述水和有機溶劑的體積比為(1～2):1；

所述加成反應的溫度為5～40℃，時間為24～72h。

優選的，所述式III所示的結構的第二化合物由以下方法制備得到：將4-(羥甲基)苯硼酸頻哪醇酯、4-硝基苯甲酰氯和無水有機溶劑混合，進行取代反應，得到式III所示的結構的第二化合物。

優選的，所述4-(羥甲基)苯硼酸頻哪醇酯和4-硝基苯甲酰氯的摩爾比為(1～1.5):1；

所述無水有機溶劑包括無水N,N-二甲基甲酰胺、無水四氫呋喃、無水二氯甲烷或無水三氯甲烷；

所述取代反應的溫度為5～40℃，時間為1～3h。

優選的，所述式II所示的結構的第一化合物、氫化鹽和式III所示的結構的第二化合物的摩爾比為1:1:1；