[發(fā)明專(zhuān)利]一種火麻仁蛋白制備抗氧化肽的方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110446314.4
• 申請(qǐng)日: 2021-04-25
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112899330A
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-06-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孔令羽;劉勝貴;蔣永昌;李智高;薛紅芬;張瓊
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 云南綠新生物藥業(yè)有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12P21/00
• 分類(lèi)號(hào): C12P21/00;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/20;C07K1/18;C07K1/14;C12R1/125
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

本發(fā)明公開(kāi)了一種火麻仁蛋白制備抗氧化肽的方法，包括以下步驟：用超聲波細(xì)胞粉碎器作用火麻仁得到火麻仁粕，用堿法提取火麻仁蛋白質(zhì)；配制枯草芽孢桿菌液體發(fā)酵培養(yǎng)基，將火麻仁蛋白接種至發(fā)酵液中培養(yǎng)；發(fā)酵液離心取上清液，所得肽溶液以凝膠層析柱分離純化，收集洗脫組分的第二峰，液質(zhì)聯(lián)用色譜分離鑒定，得到火麻仁抗氧化肽粗品；火麻仁抗氧化肽粗品經(jīng)過(guò)二次純化即得抗氧化純品。有益效果為：本制備方法利用枯草芽孢桿菌進(jìn)行發(fā)酵，具有酶產(chǎn)率和回收率高等優(yōu)點(diǎn)，顯著降低50~80%成本，提高10~20%得率，抗氧化肽純品中火麻仁抗氧化肽的純度較高，其對(duì)DPPH自由基和羥自由基的清除率達(dá)90%以上，且具有溶血栓和降血壓的功效，有較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種火麻仁蛋白制備抗氧化肽的方法。

背景技術(shù)

人體內(nèi)一切活性的物質(zhì)均以肽的形式存在，人體內(nèi)存在成百上千種肽，以大腦的肽最多，約占體內(nèi)肽的70%，肽涉及人體激素、神經(jīng)、內(nèi)分泌、免疫、生殖等。幾乎所有的細(xì)胞都受多肽的調(diào)節(jié)，如細(xì)胞生長(zhǎng)、細(xì)胞分化、合成增殖、神經(jīng)激素遞質(zhì)的調(diào)節(jié)、免疫調(diào)節(jié)等。這些內(nèi)源性生物肽在體內(nèi)發(fā)揮很強(qiáng)的生理功能和生物活性，是人體重要的生理調(diào)節(jié)劑。胰島素、生長(zhǎng)素、谷胱甘肽、超氧化歧化酶等是已知體內(nèi)起功能作用的肽類(lèi)。

但是，隨著年齡的增大、或者各種因素有可能導(dǎo)致內(nèi)分泌失調(diào)和神經(jīng)系統(tǒng)失調(diào)，這時(shí)僅靠我們體內(nèi)自身合成各種肽類(lèi)來(lái)調(diào)節(jié)生理功能顯然不能滿足人體的正常生理需要。因此，靠攝食生物活性肽來(lái)維持人體的健康，越來(lái)越得到大眾的認(rèn)可。生物活性肽易于吸收，高營(yíng)養(yǎng)，而且具有生理功能，其直接作用于神經(jīng)傳遞、刺激腸道受體激素或刺激酶的分泌而發(fā)揮生理功能?；钚噪氖峭ㄟ^(guò)抑制慢性病的發(fā)生、提高自身的免疫途徑來(lái)促進(jìn)人體健康，因而應(yīng)用越來(lái)越廣泛，多肽產(chǎn)物作為嬰幼兒食品、老年人食品、美容食品、腸道調(diào)節(jié)功能食品和免疫食品等食品基料來(lái)應(yīng)用的，臨床上可作為消化不良、創(chuàng)燒傷、腦病等患者的輔助治療食品。

抗氧化肽就是生物活性肽其中重要的一種，是蛋白質(zhì)類(lèi)物質(zhì)中比較有前途的肽類(lèi)。因?yàn)樽罱陙?lái)發(fā)現(xiàn)一些多肽和氨基酸具有較高的抗氧化性，多肽的抗氧化作用比維生素C和維生素E這些傳統(tǒng)的抗氧化劑的優(yōu)勢(shì)在于它的抗氧化持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)，與SOD酶相比較，抗氧化肽的結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，而且不會(huì)過(guò)敏。SOD可以清除超氧陽(yáng)離子，但對(duì)于衰老和不健康狀況所產(chǎn)生的超氧陽(yáng)離子，攝入抗氧化肽來(lái)減少這些自由基的攻擊很有意義?？寡趸牡目寡趸栽谀承┓矫姹葌鹘y(tǒng)的抗氧化物質(zhì)優(yōu)越：較好的抗氧化活性、很高的安全性以及生理調(diào)節(jié)功能和營(yíng)養(yǎng)因素，因此 ，抗氧化肽的醫(yī)藥、食品領(lǐng)域前景極好，具有廣闊的開(kāi)發(fā)和應(yīng)用前景。

火麻為?？浦参锎舐?Cannabis sativa L.)的干燥成熟種子，別名又叫大麻仁、火麻、線麻子。我國(guó)是火麻資源最豐富的國(guó)家，在云南、黑龍江、遼寧、廣西、四川等地均有分布，秋季果實(shí)成熟時(shí)采收，除去雜質(zhì)，曬干后為火麻仁。火麻仁味甘，性平，歸脾、胃、大腸經(jīng)，功效潤(rùn)腸通便、潤(rùn)燥殺蟲(chóng)?；鹇槿手械挠幸嫖镔|(zhì)非常豐富，特別是不飽和脂肪酸和γ-生育酚為其帶來(lái)了較強(qiáng)的抗氧化、降低血脂，降壓和延緩衰老的功效。

火麻仁它富含人體不能合成的必須脂肪酸，尤其是γ-亞麻酸，這種對(duì)人體健康十分有益的亞麻酸通常只在藍(lán)綠藻及黑醋栗種子油中才含有；火麻仁中的油酸、亞油酸、花生四烯酸等對(duì)人體也非常有益?；鹇槿实鞍踪|(zhì)65-70%是麻仁球蛋白和麻仁清蛋白，其中麻仁球蛋白是所有蛋白質(zhì)中最易被消化的；火麻仁蛋白中不含色氨酸抑制因子，故不會(huì)影響蛋白的吸收，也不會(huì)造成胃脹反胃。另外，火麻仁中維生素E含量也比較高。通過(guò)以往的的科學(xué)研究，正常的大鼠灌服火麻仁提取物，其血壓顯著降低；對(duì)照組飼喂高脂飼料，給藥組在此基礎(chǔ)上加10%火麻仁干品，結(jié)果表明，火麻仁有阻止大鼠血清膽固醇升高的作用。由此可見(jiàn)，火麻仁具有降血壓，血脂功效。不僅如此，隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)與文化的進(jìn)步，越來(lái)越多的女性著重于自身的健康發(fā)展，對(duì)于抗氧化、抗衰老的需求日趨增高。研究發(fā)現(xiàn)，火麻油可通過(guò)增強(qiáng)機(jī)體抗氧化作用及對(duì)免疫疫系統(tǒng)的影響而延緩衰老；用火麻仁片每天給模型小鼠灌胃一次，連續(xù)給藥40d后能顯著增加小鼠排便次數(shù)。分析認(rèn)為火麻仁具有潤(rùn)滑腸壁、輕度興奮腸管、增加蠕動(dòng)、減少大腸吸收水分的作用。