[發明專利]改善睡眠的夏枯草有效成分的制備方法及藥物制劑

在審

• 申請號: 202110439591.2
• 申請日: 2021-04-23
• 公開（公告）號: CN113185405A
• 公開（公告）日: 2021-07-30
• 發明（設計）人: 程發峰;姜艷艷;王雪茜
• 申請（專利權）人: 北京中醫藥大學
• 主分類號: C07C67/48
• 分類號: C07C67/48;C07C67/56;C07C69/732;C07H1/08;C07H15/203;A61K31/216;A61K31/7034;A61P25/20
• 代理公司: 北京悅成知識產權代理事務所(普通合伙) 11527
• 代理人: 高艷麗

本發明公開了改善睡眠的夏枯草有效成分的制備方法及藥物制劑。該制備方法包括：夏枯草經溶劑提取，得夏枯草提取物；夏枯草提取物過HPD?400大孔吸附樹脂柱富集，洗脫，收集洗脫液，除去溶劑，得夏枯草洗脫物；夏枯草洗脫物上硅膠柱，將硅膠柱自柱頭向底部平均切割成10～30段，采用薄層色譜法分別檢識各段硅膠段，分別合并含有迷迭香酸或異迷迭香酸苷的硅膠段，甲醇洗脫，洗脫液除去溶劑，干燥，分別得迷迭香酸有效部位和異迷迭香酸苷有效部位；異迷迭香酸苷有效部位和迷迭香酸有效部位溶解，C₁₈反向硅膠柱純化，分別得異迷迭香酸苷單體和迷迭香酸單體。本發明方法兼顧了迷迭香酸單體和異迷迭香酸苷單體的產率和純度，且步驟少。

技術領域

本發明涉及一種改善睡眠的夏枯草有效成分的制備方法及藥物制劑，具體涉及一種從夏枯草中提取迷迭香酸單體和異迷迭香酸苷單體的制備方法，及含有迷迭香酸單體和異迷迭香酸苷單體的藥物制劑。

背景技術

夏枯草(Prunella vulgarls L.)為唇形科植物夏枯草的干燥成熟果穗或全草，性寒，味苦、辛，歸肝、膽經，具有清火、明目、散結、消腫之功效，用于目赤腫痛、目珠夜癰、頭痛眩暈、痹病、癌瘤和乳腺腫痛，甲狀腺腫大，淋巴結結核、乳腺增生、高血壓等癥。夏枯草的化學成分復雜，主要有黃酮類、三萜皂苷類、苯丙素、甾體、有機酸、揮發油及糖等。CN101507751A公開了夏枯草的乙醇提取物具有明顯的鎮靜、催眠活性。CN109646445A公開了夏枯草中的異迷迭香酸苷和迷迭香酸具有改善睡眠的作用。

由于迷迭香酸在夏枯草中含量較大，因此目前現有技術多采用冷浸法、滲漉法、索氏提取法、超聲波法、纖維素酶輔助法等方法提取迷迭香酸。如CN110540503A用纖維素酶輔助法提取夏枯草中迷迭香酸。再如CN108658769A結合響應面法和酶法提取夏枯草中迷迭香酸，提高迷迭香酸的得率，使得夏枯草中迷迭香酸的產率達到17.69mg/g以上。而現有技術對夏枯草中特征性成分異迷迭香酸苷的提取研究則較少，更未有報道以迷迭香酸和異迷迭香酸苷作為改善睡眠藥效的物質基礎進行提取，這阻礙了迷迭香酸和異迷迭香酸苷研發成臨床新藥的進度。因此，急需一種以迷迭香酸和異迷迭香酸苷作為指標成分，建立夏枯草改善睡眠作用的有效成分的制備方法。

發明內容

有鑒于此，本發明的一個目的在于提供一種改善睡眠的夏枯草有效成分的制備方法。本發明以迷迭香酸和異迷迭香酸苷為指標，建立了改善睡眠作用的夏枯草有效成分的制備工藝，所得迷迭香酸單體和異迷迭香酸苷單體的產率高，純度高，且工藝步驟少。

本發明的另一個目的在于提供一種藥物制劑。

本發明采用如下技術方案實現上述目的。

本發明提供一種改善睡眠的夏枯草有效成分的制備方法，包括如下步驟：

1)提取步驟：

取夏枯草，加溶劑提取，得夏枯草提取物；

2)富集步驟：

取夏枯草提取物上HPD-400大孔吸附樹脂柱，先用3～5BV水除雜，再用4～7BV的20vol％～50vol％乙醇水溶液洗脫，收集洗脫液，除去溶劑，得夏枯草洗脫物；

3)純化步驟：

取夏枯草洗脫物，上硅膠柱，以1～2BV體積比為(7～8):(2～3):(0.2～0.3)的二氯甲烷-甲醇-水作為洗脫劑洗脫，揮干洗脫劑，將硅膠柱自柱頭向底部平均切割成10～30段，采用薄層色譜法分別檢識各段硅膠段，分別合并含有迷迭香酸或異迷迭香酸苷的硅膠段，甲醇洗脫，洗脫液除去溶劑，干燥，分別得迷迭香酸有效部位和異迷迭香酸苷有效部位；

4)進一步純化步驟：

分別取異迷迭香酸苷有效部位和迷迭香酸有效部位，用20vol％～50vol％甲醇水溶液溶解，作為上樣液，取C₁₈反向硅膠柱純化，分別得異迷迭香酸苷單體和迷迭香酸單體。