[發明專利]與大豆蛋白含量顯著關聯的單核苷酸突變位點SNP、KASP標記及其應用

有效

• 申請號: 202110429090.6
• 申請日: 2021-04-21
• 公開（公告）號: CN112877467B
• 公開（公告）日: 2023-06-06
• 發明（設計）人: 陳華濤;張威;許文靜;張紅梅;崔曉艷;劉曉慶;陳新
• 申請（專利權）人: 江蘇省農業科學院
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11;A01H1/04
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 唐蕙芬

1.一種與大豆蛋白含量顯著關聯的核苷酸突變位點SNP的KASP分子標記引物在大豆蛋白含量性狀的分子標記輔助選擇育種中的應用，其特征在于：所述SNP為S14_73926，位于大豆基因組v2.0的14號染色體73,926?bp位置，發生了堿基G至A的替換，該SNP所處的核苷酸序列如Seq?ID?NO.1所示；

該KASP分子標記引物序列為：

KASP標記上游引物F1序列為5’-gaaggtgaccaagttcatgctgttgaagtgagatatggtggacg-3’；

KASP標記上游引物F2序列為5’-gaaggtcggagtcaacggattgttgaagtgagatatggtggaca-3’；

KASP標記下游引物R序列為5’-ttccacctcgccattcatcc-3’；

根據AA基因型得到高大豆蛋白含量的單株或株系。

2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于：

（1）大豆植株基因組DNA的提??；

（2）采用權利要求1所述的KASP分子標記引物對基因組DNA進行PCR擴增并檢測權利要求1所述的SNP基因型：

將權利要求1所述的KASP分子標記引物加入同一PCR反應體系，并設置2個以超純水代替樣品模版DNA的空白對照，在熒光定量PCR儀上對模板DNA進行擴增；

熒光定量PCR儀對PCR反應產物進行熒光數據讀取，熒光掃描的結果自動轉化成圖形，該KASP分子標記引物將兩種基因型分開，其中靠近Y軸的圓點為攜帶A等位變異位點，基因型為AA；靠近X軸的圓點為攜帶G等位變異位點，基因型為GG；

（3）根據AA基因型在不同分離世代選擇得到高大豆蛋白含量的單株或株系。