[發(fā)明專利]一種熒光蠶絲材料的制備方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110426153.2
• 申請(qǐng)日: 2021-04-20
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN113136202A
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-07-20
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王峰;夏慶友;趙萍;田弛
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 西南大學(xué)
• 主分類號(hào): C09K11/06
• 分類號(hào): C09K11/06;C07K14/435;C07K1/34;B01J13/00;C08L89/00;C08J5/18
• 代理公司: 重慶智慧之源知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 50234
• 代理人: 余洪;高彬

1.一種熒光蠶絲材料的制備方法，其特征在于：從轉(zhuǎn)基因家蠶品種的蠶繭中提取DsRed1蛋白、超濾濃縮后得到DsRed1濃縮液；對(duì)所述DsRed1濃縮液進(jìn)行堿性蛋白酶滅活得到熒光蛋白溶液；對(duì)所述熒光蛋白溶液與絲素蛋白溶液混合后冷凍干燥得到DsRed1/Fibroin凍干復(fù)合物。

2.如權(quán)利要求1所述一種熒光蠶絲材料的制備方法，其特征在于，所述DsRed1蛋白的提取過(guò)程為：將轉(zhuǎn)基因家蠶品種的蠶繭加入研磨機(jī)粉碎，將粉碎后的蠶繭溶解于含有堿性蛋白酶的Tris-HCl溶液中，在50℃-55℃下提取；提取后進(jìn)行過(guò)濾后收集濾液，然后分別用濾紙、微孔濾膜進(jìn)行再次過(guò)濾得到DsRed1提取液。

3.如權(quán)利要求2所述一種熒光蠶絲材料的制備方法，其特征在于：所述堿性蛋白酶的加入量為所述Tris-HCl溶液質(zhì)量的0.3％。

4.如權(quán)利要求2所述一種熒光蠶絲材料的制備方法，其特征在于：所述DsRed1蛋白提取時(shí)蠶繭與溶液的浴比為10-25mg/mL。

5.如權(quán)利要求1所述一種熒光蠶絲材料的制備方法，其特征在于：將經(jīng)堿性蛋白酶滅活處理后得到的所述熒光蛋白溶液在-20℃環(huán)境中冷凍過(guò)夜，冷凍干燥得到DsRed1凍干粉。

6.如權(quán)利要求1所述一種熒光蠶絲材料的制備方法，其特征在于，所述絲素蛋白溶液的制備方法為：將兩廣二號(hào)蠶繭置于0.2％Na₂CO₃溶液中經(jīng)沸水浴脫膠后，用去離子水洗滌干凈并干燥；然后將脫膠后的蠶絲用LiBr溶液置于65℃烘箱進(jìn)行溶解，溶解后的絲素溶液用截留分子量為10kDa的透析袋置于去離子水中透析，將透析后的絲素溶液經(jīng)離心后取上清獲得絲素蛋白溶液。

7.如權(quán)利要求1所述一種熒光蠶絲材料的制備方法，其特征在于：所述DsRed1/Fibroin凍干復(fù)合物制備的冷凍干燥過(guò)程為將所述熒光蛋白溶液與絲素蛋白溶液混合均勻后放置于-20℃環(huán)境中冷凍12h，然后在-80℃下冷凍24h。

8.如權(quán)利要求1所述一種熒光蠶絲材料的制備方法，其特征在于：將所述DsRed1/Fibroin凍干復(fù)合物以質(zhì)量2.5％的比例溶解于去離子水中，然后將混合溶液加入成膜容器，干燥得到DsRed1/Fibroin膜材料。

9.如權(quán)利要求1所述一種熒光蠶絲材料的制備方法，其特征在于：將所述DsRed1/Fibroin凍干復(fù)合物以質(zhì)量2.5％的比例溶解于去離子水中，將混合溶液在所需材料上進(jìn)行噴涂，干燥后得到DsRed1/Fibroin熒光圖案。

10.如權(quán)利要求5所述一種熒光蠶絲材料的制備方法，其特征在于：將所述DsRed1凍干粉以質(zhì)量0.1％的比例溶解于蛋白濃度為2％的絲素蛋白溶液中，然后將溶液放置于4℃冰箱，并靜置3-5天，形成DsRed1/Fibroin凝膠材料。