[發明專利]一種具有抗氧化和DPP-IV抑制功能的海參肽及其制備方法

有效

• 申請號: 202110417201.1
• 申請日: 2021-04-19
• 公開（公告）號: CN113151388B
• 公開（公告）日: 2022-09-09
• 發明（設計）人: 劉懷高;羅永康;賴圓圓;崔景林;張恒
• 申請（專利權）人: 國肽生物工程（常德）有限公司
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/20;C07K1/16;C07K7/06;A23L33/18;A61K38/08;A61P39/06;A61P3/10
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 商秀玲

1.一種海參肽，其特征在于，所述海參肽采用包括如下步驟的方法制備得到：以海參為原料，將經前處理的原料經兩步酶解制得酶解物；

所述兩步酶解中，第一步酶解使用的酶為復合蛋白酶，所述復合蛋白酶為堿性蛋白酶、胰蛋白酶和中性蛋白酶，第二步酶解使用的酶為風味蛋白酶；

所述海參肽含有質量百分含量為≥80%的功能肽，所述功能肽的序列如SEQ ID NO.1所示。

2.根據權利要求1所述的海參肽，其特征在于，所述復合蛋白酶中，堿性蛋白酶、胰蛋白酶和中性蛋白酶的質量之比為（1-2）：1：（1-2），所述堿性蛋白酶的酶活為50,000-500,000U/g，所述胰蛋白酶的酶活為100,000-1,000,000U/g，所述中性蛋白酶的酶活為100,000-650,000U/g。

3.根據權利要求2所述的海參肽，其特征在于，所述第一步酶解中，復合蛋白酶與原料蛋白的用量質量比為0.4-0.9%，酶解條件為45-60℃酶解3-7h；

所述第二步酶解中，風味蛋白酶與原料蛋白的用量質量比為0.1-0.2%，所述風味蛋白酶的酶活為80,000-250,000U/g，酶解條件為50-60℃酶解0.5-1h。

4.根據權利要求1~3任一項所述的海參肽，其特征在于，所述前處理包括：將海參經高溫高壓蒸煮后，經均質得到原料蛋白液；

所述高溫高壓蒸煮為在100-120℃、0.1-0.3Mpa條件下蒸煮30-120min。

5.根據權利要求1~3任一項所述的海參肽，其特征在于，所述制備方法還包括：將所述酶解物進行滅酶處理后，再進行過濾和目標肽的分離；

所述過濾包括：先利用孔徑為納米級別的陶瓷膜過濾，濾液再經過納濾膜過濾處理，收集截留液；

將截留液先用孔徑為5000道爾頓的超濾膜超濾，再用孔徑為2000道爾頓的膜將分子量小于2000道爾頓的蛋白肽分離。

6.根據權利要求5所述的海參肽，其特征在于，所述目標肽的分離包括：

將所述分子量為小于2000的蛋白肽先經過SephadexG-15凝膠分離，洗脫液為去離子水，洗脫峰在280nm下進行檢測，收集第1個洗脫峰，再用RP-HPLC反相高效液相色譜分離；分離條件如下：采用C18色譜柱，以含0.1%TFA的水溶液為流動相A，含0.1%TFA的乙腈溶液為流動相B，采用梯度洗脫進行分離：0-5min，5%的流動相B；5-45min，5-45%的流動相B；45-55min，45-5%的流動相B，流速為1 mL/min，收集8-11分鐘分離的蛋白肽溶液。

7.功能性多肽，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

8.權利要求1~6任一項所述的海參肽或權利要求7所述的功能性多肽在制備藥品中的應用；

所述藥品具有抗氧化和/或DPP-IV抑制功能。

9.含有權利要求1~6任一項所述的海參肽或權利要求7所述的功能性多肽的藥品。