[發明專利]一種高效合成乳鐵蛋白的畢赤酵母及其構建方法與應用有效
| 申請號: | 202110415407.0 | 申請日: | 2021-04-18 |
| 公開(公告)號: | CN112940955B | 公開(公告)日: | 2022-10-18 |
| 發明(設計)人: | 劉龍;陳堅;呂雪芹;堵國成;李江華;劉延峰;崔世修 | 申請(專利權)人: | 江南大學 |
| 主分類號: | C12N1/19 | 分類號: | C12N1/19;C12N15/81;C12N15/67;C12N15/31;C12N15/12;C12P21/02;C12R1/84 |
| 代理公司: | 蘇州市中南偉業知識產權代理事務所(普通合伙) 32257 | 代理人: | 王玉仙 |
| 地址: | 214122 江蘇*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 高效 合成 鐵蛋白 酵母 及其 構建 方法 應用 | ||
1.一種高效合成乳鐵蛋白的畢赤酵母,其特征在于,所述的畢赤酵母強化表達了宿主中的分子伴侶HSP70、Ydj1、GrpE中的一種和BiP、Sec61a中的一種,所述的宿主異源表達了人源乳鐵蛋白;
所述的分子伴侶HSP70的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,Ydj1的核苷酸序列如SEQ IDNO.2所示,GrpE 的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示,BiP的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示,Sec61a的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示;
分子伴侶HSP70、Ydj1、GrpE采用啟動子FLD1進行增強表達;
分子伴侶BiP、Sec61a采用啟動子GAP進行增強表達;
所述的宿主為異源表達了人源乳鐵蛋白的畢赤酵母GS115。
2.根據權利要求1所述的畢赤酵母,其特征在于,所述的乳鐵蛋白的核苷酸序列如SEQID NO.6所示。
3.一種權利要求1~2任一項所述的畢赤酵母的構建方法,其特征在于,包括如下步驟:
S1、分別構建分子伴侶HSP70、Ydj1、GrpE中的一種和BiP、Sec61a中的一種的啟動子表達分子伴侶的表達框;
S2、將S1步驟構建的表達框轉化到異源表達了人源乳鐵蛋白的宿主中,篩選得到重組畢赤酵母。
4.權利要求1~2任一項所述的畢赤酵母在發酵生產乳鐵蛋白中的應用。
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