[發明專利]一種高效制備丹酚酸B和紫草酸的方法

在審

• 申請號: 202110413010.8
• 申請日: 2021-04-16
• 公開（公告）號: CN113402489A
• 公開（公告）日: 2021-09-17
• 發明（設計）人: 張進杰;王岱杰;孫軒;鄒祖全;楊文鴿;徐大倫;崔莉;趙恒強
• 申請（專利權）人: 寧波大學
• 主分類號: C07D307/86
• 分類號: C07D307/86
• 代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221
• 代理人: 王磊

本發明公開了一種高效制備丹酚酸B和紫草酸的方法，采用pH區帶逆流色譜對含有丹酚酸B和紫草酸的樣品進行分離純化；pH區帶逆流色譜的溶劑系統由叔丁基甲醚、水組成，叔丁基甲醚和水的體積比為1:0.9～1.1，溶劑系統的上相溶液作為固定相，溶劑系統的下相溶液作為流動相，固定相中添加酸，流動相中添加堿。本發明提供的方法能夠同時獲得丹酚酸B與紫草酸，純度均在95％以上。

技術領域

本發明涉及一種高效制備丹酚酸B和紫草酸的方法。

背景技術

公開該背景技術部分的信息僅僅旨在增加對本發明的總體背景的理解，而不必然被視為承認或以任何形式暗示該信息構成已經成為本領域一般技術人員所公知的現有技術。

滇丹參(Salvia yunnanensis Radix)為唇形科植物云南鼠尾草(Salviayunnanensis C.H.Wright)的干燥根，又稱紫丹參，在云南、貴州地區有悠久的藥用歷史，始載于明代《滇南本草》中。滇丹參的活性作用與丹參(Salvia miltiorrhizaBge.)相似，其生物活性主要是對循環系統的影響，如改善微循環和血液循環功能、提升心臟冠脈血通量并修復心臟功能、降血脂、預防動脈粥樣硬化，另外還有肝臟保護、治療胃潰瘍、鎮痛、抗氧化、抗菌抗炎、抗腫瘤等。另有研究表明，滇丹參有顯著的抑制血小板凝集的作用，且抑制效果明顯優于丹參。滇丹參中的酚酸類化合物主要起到抗炎、抗氧化、抗血栓以及心血管保護的作用，以丹酚酸A～K為代表，其中丹酚酸B含量最高。然而，發明人研究發現，丹酚酸B與紫草酸的結構較為類似，采用普通色譜法難以同時獲得高純度的丹酚酸B與紫草酸。

發明內容

為了解決現有技術的不足，本發明的目的是提供一種高效制備丹酚酸B和紫草酸的方法，采用該方法能夠同時獲得丹酚酸B與紫草酸，純度均在95％以上。

pH區帶逆流色譜是一種液-液色譜技術，根據化合物的pKa和極性的差異實現成分的分離，該技術具有分離效率高、重現性好、進樣量大等優點。本發明采用首先以各種溶劑體系(例如石油醚–乙酸乙酯–甲醇–水、乙酸乙酯–甲醇–水、乙酸乙酯–正丁醇–水、乙酸乙酯–水、氯仿–甲醇–水)進行嘗試，但是難以實現丹酚酸B和紫草酸的分離提取，當采用叔丁基甲醚–乙腈–水(4:1:5,v/v)作為溶劑系統，結果發現該溶劑系統可以實現丹酚酸B與紫草酸的分離提取，但是分離提取時間較長，僅洗脫丹酚酸B就需要9h，由于分離提取時間較長，造成pH區帶逆流色譜分離提取丹酚酸B和紫草酸困難。

為了實現上述目的，本發明的技術方案為：

一方面，一種高效制備丹酚酸B和紫草酸的方法，采用pH區帶逆流色譜對含有丹酚酸B和紫草酸的樣品進行分離純化；pH區帶逆流色譜的溶劑系統由叔丁基甲醚、水組成，叔丁基甲醚和水的體積比為1:0.9～1.1，溶劑系統的上相溶液作為固定相，溶劑系統的下相溶液作為流動相，固定相中添加酸，流動相中添加堿。

本發明經過研究發現以叔丁基甲醚–乙腈–水(4:1:5,v/v/v)作為溶劑系統時，樣品在乙腈中的溶解度比在水和叔丁基甲醚中的溶解度都要好，而乙腈對叔丁基甲醚的親和度更好，導致樣品保留時間較長。因而本發明重新調整溶劑系統，經過試驗發現，采用該溶劑系統能夠使得丹酚酸B和紫草酸在13h即可完成分離，大大降低了丹酚酸B和紫草酸的分離時間。

同時，經過進一步研究發現，固定相的酸濃度和流動相的堿濃度也能夠降低丹酚酸B和紫草酸的分離時間，當固定相中的酸濃度4.5～5.5mM、流動相中的堿濃度為59～61mM時，丹酚酸B和紫草酸的分離時間能夠縮短至9h。

另一方面，一種上述方法在提取滇丹參中丹酚酸B和紫草酸的應用。

由于滇丹參中的丹酚酸B含量較高，且存在紫草酸，采用上述方法用于滇丹參的提取，能夠有效將滇丹參中的丹酚酸B和紫草酸同時提取出來。

第三方面，一種滇丹參中丹酚酸B和紫草酸的提取方法，步驟如下：