[發明專利]一種高效制備丹酚酸B和紫草酸的方法

在審

• 申請號: 202110413010.8
• 申請日: 2021-04-16
• 公開（公告）號: CN113402489A
• 公開（公告）日: 2021-09-17
• 發明（設計）人: 張進杰;王岱杰;孫軒;鄒祖全;楊文鴿;徐大倫;崔莉;趙恒強
• 申請（專利權）人: 寧波大學
• 主分類號: C07D307/86
• 分類號: C07D307/86
• 代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221
• 代理人: 王磊

1.一種高效制備丹酚酸B和紫草酸的方法，其特征是，采用pH區帶逆流色譜對含有丹酚酸B和紫草酸的樣品進行分離純化；pH區帶逆流色譜的溶劑系統由叔丁基甲醚、水組成，叔丁基甲醚和水的體積比為1:0.9～1.1，溶劑系統的上相溶液作為固定相，溶劑系統的下相溶液作為流動相，固定相中添加酸，流動相中添加堿。

2.如權利要求1所述的方法，其特征是，固定相中的酸濃度4.5～5.5mM，流動相中的堿濃度為59～61mM。

3.如權利要求1所述的方法，其特征是，所述酸為三氟乙酸，所述堿為氨水。

4.一種權利要求1～3任一所述的方法在提取滇丹參中丹酚酸B和紫草酸的應用。

5.一種滇丹參中丹酚酸B和紫草酸的提取方法，其特征是，步驟如下：

(1)從滇丹參提取獲得滇丹參總酚酸提取物；

(2)采用pH區帶逆流色譜滇丹參總酚酸提取物進行分離純化獲得含有丹酚酸B和紫草酸的餾分；

(3)采用pH區帶逆流色譜對將含有丹酚酸B和紫草酸的餾分進行分離純化；

其中，步驟(3)中pH區帶逆流色譜的溶劑系統由叔丁基甲醚、水組成，叔丁基甲醚和水的體積比為1:0.9～1.1，溶劑系統的上相溶液作為固定相，溶劑系統的下相溶液作為流動相，固定相中添加酸，流動相中添加堿。

6.如權利要求5所述的提取方法，其特征是，步驟(3)中，固定相中的酸濃度4.5～5.5mM，流動相中的堿濃度為59～61mM；

或，步驟(3)中，固定相中的酸濃度4.5～5.5mM，流動相中的堿濃度為59～61mM；

或，步驟(3)中，所述酸為三氟乙酸，所述堿為氨水。

7.如權利要求5所述的提取方法，其特征是，步驟(1)中，從滇丹參提取獲得滇丹參總酚酸提取物的過程為：采用乙醇提取法對滇丹參進行提取，提取后的液體采用石油醚進行一次萃取，萃取后的水相調節pH至1.5～2.5，然后添加乙酸乙酯進行二次萃取，對二次萃取的乙酸乙酯相進行濃縮獲得滇丹參總酚酸提取物。

8.如權利要求7所述的提取方法，其特征是，將滇丹參加入乙醇水溶液，在65～75℃條件下進行回流提取，將提取液進行濃縮，再加水復溶，然后采用石油醚進行一次萃取；優選地，乙醇水溶液的濃度55～65％體積分數；優選地，滇丹參與乙醇水溶液的料液比為1:7.5～8.5；優選地，回流提取的次數為2～4次，每次回流提取的時間為1.5～2.5h。

9.如權利要求5所述的提取方法，其特征是，pH區帶逆流色譜分離提取的過程為：將固定相輸送至分離柱，將滇丹參總酚酸提取物的溶液注入分離柱，然后將流動相輸送持續輸送至分離柱進行分離提取；優選地，固定相輸送至分離柱的流速為25～35mL/min；優選地，流動相的流速為1.5～2.5mL/min；優選地，pH區帶逆流色譜分離提取中，紫外檢測器的檢測波長為252～256nm。

10.如權利要求5所述的提取方法，其特征是，步驟(2)中，pH區帶逆流色譜的溶劑系統，包括石油醚、乙酸乙酯、乙腈和水，其中，石油醚、乙酸乙酯、乙腈和水的體積比為1.46～1.54:2.46～2.54:1:4.6～5.4；優選地，固定相中三氟乙酸的濃度為9～11mM，流動相中氨水的濃度為29～31mM。