[發明專利]一種單抗N-糖糖型的檢測方法有效
| 申請號: | 202110407676.2 | 申請日: | 2021-04-15 |
| 公開(公告)號: | CN113109477B | 公開(公告)日: | 2022-05-27 |
| 發明(設計)人: | 李杰;蔣露;舒占永;趙雪娜;陶佳林;王永忠 | 申請(專利權)人: | 蘇州藥明生物技術有限公司 |
| 主分類號: | G01N30/02 | 分類號: | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/64 |
| 代理公司: | 北京精金石知識產權代理有限公司 11470 | 代理人: | 尉月麗 |
| 地址: | 215123 江蘇省蘇州市蘇州工*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 糖糖型 檢測 方法 | ||
1.一種單抗N-糖糖型檢測的前處理方法,其特征在于,利用置換緩沖液將樣品進行換液處理后,再加入內切酶進行酶切脫糖;
所述置換緩沖液為檸檬酸溶液;
所述檸檬酸溶液的濃度為15-25mmol/L,pH為6.3-6.7;
所述樣品為IgG1類抗體;
所述前處理方法,具體包括以下步驟:
(1)向樣品中加入置換緩沖液進行換液,經離心后,收集樣品;
(2)向收集的樣品中加入置換緩沖液,混勻,得到蛋白液;
(3)向得到的蛋白液中加入內切酶,水浴孵育。
2.根據權利要求1所述的前處理方法,其特征在于,所述內切酶為PNGase F酶。
3.一種單抗N-糖糖型的檢測方法,其特征在于,采用權利要求1-2任一項所述的前處理方法對樣品進行前處理。
4.根據權利要求3所述的檢測方法,其特征在于,對樣品進行前處理后,再進行寡糖回收、寡糖標記、復溶和液相色譜檢測。
5.根據權利要求4所述的檢測方法,其特征在于,所述寡糖標記中采用的標記試劑為2-AB。
6.根據權利要求4-5任一項所述的檢測方法,其特征在于,所述復溶采用的溶劑為超純水。
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