[發(fā)明專利]一種制備全腦組織石蠟切片的方法與應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110405737.1
• 申請(qǐng)日: 2021-04-15
• 公開（公告）號(hào): CN113203618B
• 公開（公告）日: 2022-04-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 方美英;湯啟國(guó);李貞;雒亞彪;薛明明;產(chǎn)舒恒;何帥涵;張浩;吳常信
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N1/30
• 分類號(hào): G01N1/30;G01N1/36;G01N33/53;G01N33/58;G01N21/64
• 代理公司: 北京路浩知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11002
• 代理人: 孫怡

1.一種制備全腦組織石蠟切片的方法，其特征在于，在固定步驟所采用的固定液為含3.8-4.2％的甲醛和0.9-1.1％的戊二醛的固定液；所述全腦組織來自于雞不同胚胎時(shí)期；

在脫水步驟，用于脫水的乙醇濃度梯度依次為20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％、100％、100％；

所述脫水步驟具體為：以20％的乙醇處理55-65分鐘，以30％的乙醇處理55-65分鐘，以40％的乙醇處理55-65分鐘，以50％的乙醇處理55-65分鐘，以60％的乙醇處理55-65分鐘，以70％的乙醇處理9-10小時(shí)，以80％的乙醇處理55-65分鐘，以90％的乙醇處理55-65分鐘，以95％的乙醇處理55-65分鐘，以無(wú)水乙醇處理28-32分鐘，再以更換后的無(wú)水乙醇再次處理28-32分鐘。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述固定液為含4％的甲醛和1％的戊二醛的固定液。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述脫水步驟具體為：以20％的乙醇處理1小時(shí)，以30％的乙醇處理1小時(shí)，以40％的乙醇處理1小時(shí)，以50％的乙醇處理1小時(shí)，以60％的乙醇處理1小時(shí)，以70％的乙醇處理10小時(shí)，以80％的乙醇處理1小時(shí)，以90％的乙醇處理1小時(shí)，以95％的乙醇處理1小時(shí)，以無(wú)水乙醇處理0.5小時(shí)，再以更換后的無(wú)水乙醇再次處理0.5小時(shí)。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，在固定時(shí)，先將全腦組織在固定液中固定2.8-3.2小時(shí)，之后再?gòu)娜X組織正中線切開，繼續(xù)固定至23.5-24.5小時(shí)。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，在固定時(shí)，先將全腦組織在固定液中固定3小時(shí)，之后再?gòu)娜X組織正中線切開，繼續(xù)固定至24小時(shí)。

6.權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)所述的方法在全腦組織HE染色和免疫熒光實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用。