[發(fā)明專利]一種比率型熒光探針的制備方法及其在四環(huán)素類抗生素檢測(cè)中的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110404986.9
• 申請(qǐng)日: 2021-04-15
• 公開（公告）號(hào): CN113201325B
• 公開（公告）日: 2022-12-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 鄒小波;甘子玉;胡雪桃;石吉勇
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 江蘇大學(xué)
• 主分類號(hào): C09K11/06
• 分類號(hào): C09K11/06;C09K11/77;C09K11/02;G01N21/64
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本發(fā)明屬于傳感器技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種比率型熒光探針的制備方法及其應(yīng)用；將熒光素、乙酸鋅和對(duì)苯二甲酸溶于DMF中，超聲、加熱，待反應(yīng)物冷卻后，經(jīng)洗滌、干燥，得到FSS@MOF?5熒光材料；然后溶于水中，在攪拌的條件下加入鳥苷一磷酸和硝酸銪，經(jīng)洗滌、離心、干燥，得到FSS@MOF?5@GMP/Eu熒光探針；本發(fā)明制備的比率型熒光探針能夠?qū)崿F(xiàn)四環(huán)素類抗生素的特異性檢測(cè)，不需要特異性的生物材料，如抗原抗體或者適配體等，可以減少制備特異性熒光傳感器的時(shí)間和成本；同時(shí)在紫外燈下還可以產(chǎn)生的多種顏色變化，實(shí)現(xiàn)四環(huán)素的半定量可視化檢測(cè)；檢測(cè)快速、準(zhǔn)確，操作簡(jiǎn)單且探針不易受環(huán)境影響，有利于保障食品的質(zhì)量與安全。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于傳感器技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種比率型熒光探針的制備方法及其應(yīng)用。

技術(shù)背景

四環(huán)素類抗生素，如四環(huán)素(TC)和土霉素(OTC)，作為一類用途廣泛的廣譜抗生素，已被廣泛應(yīng)用于治療動(dòng)物疾病感染或促進(jìn)家畜生長(zhǎng)的飼料添加劑。然而，在畜牧業(yè)和水產(chǎn)養(yǎng)殖中對(duì)四環(huán)素類抗生素的過度使用和濫用導(dǎo)致了四環(huán)素類抗生素殘留物累積在牛奶、肉、蛋和其他動(dòng)物食物來源的食品中。過量的四環(huán)素類抗生素殘留物可以通過食物鏈傳遞給人類，從而威脅人類的健康，導(dǎo)致肝損傷、過敏反應(yīng)和細(xì)菌耐藥性等。因此，快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)四環(huán)素類抗生素的殘留量，以保障食品安全和產(chǎn)品消費(fèi)者的健康是十分有必要的。

目前四環(huán)素類抗生素的檢測(cè)主要依靠傳統(tǒng)的技術(shù)包括毛細(xì)管電泳法、高效液相色譜法和氣相色譜-質(zhì)譜法等，這些技術(shù)往往因前處理方法繁瑣、耗時(shí)長(zhǎng)、費(fèi)用高，同時(shí)需要專業(yè)的技能等原因造成了一定的局限性，不利于實(shí)現(xiàn)快速檢測(cè)。近年來，熒光傳感技術(shù)由于其操作簡(jiǎn)單，耗時(shí)短而備受關(guān)注。

目前報(bào)道的用于四環(huán)素類抗生素檢測(cè)的熒光探針大多數(shù)是基于單熒光發(fā)射的熒光探針。單熒光發(fā)射的探針的熒光強(qiáng)度往往會(huì)受到環(huán)境和儀器等的干擾，從而降低了檢測(cè)結(jié)果的可靠性。因此，迫切需要設(shè)計(jì)和開發(fā)一種用于四環(huán)素類抗生素檢測(cè)的比率型熒光探針，提高檢測(cè)結(jié)果的可靠性。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明旨在解決所述問題之一；本發(fā)明開發(fā)一種比率型的熒光探針，能夠?qū)崿F(xiàn)四環(huán)素類抗生素的簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確及可視化檢測(cè)，克服現(xiàn)有四環(huán)素類抗生素檢測(cè)技術(shù)操作復(fù)雜、耗時(shí)長(zhǎng)，制備復(fù)雜，檢測(cè)結(jié)果不直觀等缺點(diǎn)。

為了實(shí)現(xiàn)以上目的，本發(fā)明具體包括以下步驟：

步驟1、將熒光素(FSS)、乙酸鋅和對(duì)苯二甲酸溶于N,N-二甲基甲酰胺(DMF)中，超聲、加熱，待反應(yīng)物冷卻后，經(jīng)洗滌、干燥，得到綠色發(fā)光的金屬有機(jī)框架材料，記為 FSS@MOF-5熒光材料；

步驟2、將步驟1制備的FSS@MOF-5熒光材料溶于水中，在攪拌的條件下分別加入鳥苷一磷酸和硝酸銪，經(jīng)洗滌、離心、干燥，得到綠色發(fā)光的比率型熒光材料，記為 FSS@MOF-5@GMP/Eu熒光探針。

優(yōu)選的，步驟1中所述熒光素、乙酸鋅、對(duì)苯二甲酸和N,N-二甲基甲酰胺的用量比為 0.05～0.25g：1.12～2.19g：0.25～0.4g：40～60mL。

優(yōu)選的，步驟1中所述的超聲功率為60～100W，時(shí)間為5～10min。

優(yōu)選的，步驟1中所述的加熱溫度為90～120℃，時(shí)間為6～14h。

優(yōu)選的，步驟1中所述洗滌是用N,N-二甲基甲酰胺和乙醇溶液分別洗滌1～3次；所述干燥的溫度為60～80℃，時(shí)間為24～48h。

優(yōu)選的，步驟2中所述的FSS@MOF-5熒光材料、鳥苷一磷酸、硝酸銪和水的用量比為0.01～0.05g：0.04～0.08g：0.05～0.09g：40～60mL。

優(yōu)選的，步驟2中所述的攪拌時(shí)間為1～3h。

優(yōu)選的，步驟2中所述洗滌是用水溶液洗滌1～3次；所述的離心轉(zhuǎn)速為3000～5000rpm，離心時(shí)間為5～10min。