[發明專利]從丁香茄葉提取的化合物1、化合物2及其制備方法與應用

在審

• 申請號: 202110404358.0
• 申請日: 2021-04-15
• 公開（公告）號: CN113861022A
• 公開（公告）日: 2021-12-31
• 發明（設計）人: 代麗萍;白巖松;池軍;張玲霞;王智民;鄭巖
• 申請（專利權）人: 河南中醫藥大學
• 主分類號: C07C59/82
• 分類號: C07C59/82;C07C59/42;C07C51/47;C07C51/48;A61P29/00;A61P1/04
• 代理公司: 鄭州天陽專利事務所(普通合伙) 41113
• 代理人: 聶孟民

1.一種從丁香茄葉提取的化合物1、化合物2，化合物1為12-oxo-phytodienoic acid、化合物2為(9R,10E,12Z)-9-hydroxyoctadeca-10,12-dienoic acid，分子結構式分別為：

2.權利要求1所述的從丁香茄葉提取的化合物1、化合物2的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)取干燥的丁香茄葉5kg，每次加體積濃度70％的乙醇30～100L，100℃煮沸提取2～6次，每次提取2～4h，合并提取液，減壓濃縮，得50℃相對密度1.2～1.4的第一浸膏；

(2)將第一浸膏用0.5～3L水分散成水分散液，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取，每次水分散液與萃取液體積比為1︰1，萃取2～5次，收集乙酸乙酯萃取液，減壓濃縮，得到50℃相對密度1.2～1.4的第二浸膏；

(3)第二浸膏經100～200目硅膠柱柱色譜，硅膠柱r＝6～10cm，H＝15～30cm，用體積比100︰0、100︰1的二氯甲烷-甲醇進行梯度洗脫，每個比例洗脫5.1～94L，收集100︰1的洗脫液，減壓濃縮，得到50℃相對密度1.2～1.4的第三浸膏；

(4)第三浸膏經200～300目硅膠柱柱色譜，硅膠柱r＝4～8cm，H＝15～25cm，用體積比100︰0、100︰5、100︰10的石油醚-乙酸乙酯進行梯度洗脫，每個比例洗脫2.25～50L，收集100︰10的洗脫液，減壓濃縮，得到50℃相對密度1.2～1.4的第四浸膏；

(5)第四浸膏經MCI柱柱色譜，MCI柱r＝3～6cm，H＝5～10cm，用體積比30︰70、50︰50、70︰30、90：10的甲醇-水進行梯度洗脫，流速為10～50mL/min，每個比例洗脫0.42～11L，收集90︰10的洗脫液，減壓濃縮，得到50℃相對密度1.2～1.4的第五浸膏；

(6)第五浸膏經ODS柱柱色譜，ODS柱r＝2～5cm，H＝4～8cm，用體積比43︰57、45︰55的乙腈-體積濃度0.1％甲酸水進行梯度洗脫，流速10～50mL/min，每個比例洗脫0.15～6.3L，收集43︰57的洗脫液，減壓回收，得化合物12-oxo-phytodienoic acid，收集45︰55的洗脫液，減壓回收，得化合物(9R,10E,12Z)-9-hydroxyoctadeca-10,12-dienoic acid。

3.根據權利要求2所述的從丁香茄葉提取的化合物1、化合物2的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)取干燥的丁香茄葉5kg，每次加體積濃度70％的乙醇80L，100℃煮沸提取4次，每次提取2h，合并提取液，減壓濃縮，得50℃相對密度1.3的第一浸膏；

(2)將第一浸膏用3L水分散成水分散液，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取，每次水分散液與萃取液體積比為1︰1，萃取5次，收集乙酸乙酯萃取液，減壓濃縮，得到50℃相對密度1.3的第二浸膏；

(3)第二浸膏經100～200目硅膠柱柱色譜，硅膠柱r＝9cm，H＝20cm，用體積比100︰0、100︰1的二氯甲烷-甲醇進行梯度洗脫，每個比例洗脫35.6L，收集100︰1的洗脫液，減壓濃縮，得到50℃相對密度1.3的第三浸膏；

(4)第三浸膏經200～300目硅膠柱柱色譜，硅膠柱r＝6cm，H＝15cm，用體積比100︰0、100︰5、100︰10的石油醚-乙酸乙酯進行梯度洗脫，每個比例洗脫11.9L，收集100︰10的洗脫液，減壓濃縮，得到50℃相對密度1.3的第四浸膏；

(5)第四浸膏經MCI柱柱色譜，MCI柱r＝5cm，H＝8cm，用體積比30︰70、50︰50、70︰30、90：10的甲醇-水進行梯度洗脫，流速為20mL/min，每個比例洗脫4.4L，收集90︰10的洗脫液，減壓濃縮，得到50℃相對密度1.3的第五浸膏；

(6)第五浸膏經ODS柱柱色譜，ODS柱r＝3cm，H＝8cm，用體積比43︰57、45︰55的乙腈-體積濃度0.1％甲酸水進行梯度洗脫，流速20mL/min，每個比例洗脫1.6L，收集43︰57的洗脫液，減壓回收，得化合物12-oxo-phytodienoic acid，收集45︰55的洗脫液，減壓回收，得化合物(9R,10E,12Z)-9-hydroxyoctadeca-10,12-dienoic acid。