[發明專利]外泌體用于防止腦型瘧疾發生的實驗方法有效
| 申請號： | 202110401910.0 | 申請日： | 2021-04-14 |
| 公開（公告）號： | CN113144222B | 公開（公告）日： | 2023-05-23 |
| 發明（設計）人： | 陳光;杜云婷 | 申請（專利權）人： | 臺州學院 |
| 主分類號： | A61K49/00 | 分類號： | A61K49/00;A61K35/18;A61P33/06;C12N5/078 |
| 代理公司： | 深圳紫晴專利代理事務所(普通合伙) 44646 | 代理人： | 陳映輝 |
| 地址： | 318000 浙江*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 體用 防止 瘧疾 發生 實驗 方法 | ||
1.一種外泌體用于防止腦型瘧疾發生的實驗方法，其特征在于：
S1、利用P.y17XNL鼠瘧模型，提取外周血后超速離心法或磁珠免疫捕獲法分離純化外泌體；
S2、利用外泌體或外泌體聯合CpGODN不同途徑免疫正常C57BL/6J小鼠，固定時間點P.bANKA攻擊，動態觀察感染過程、神經系統癥狀和血腦屏障BBB完整性，確定外泌體的免疫效應；
所述S1具體包括外泌體提取和外泌體鑒定；
其中，外泌體提取包括BALB/c小鼠經腹腔注射1×106P.y17XNL寄生的紅細胞pRBC，確定蟲血癥20％-30％后提取外泌體；
采用超速離心法或磁珠免疫捕獲法提取P.y17XNL感染的BALB/c小鼠外周血中的外泌體，測蛋白濃度后置于-80℃冰箱中備用；
所述外泌體鑒定包括采用透射電鏡和WB方法對上述提取的外泌體形態結構、粒徑大小和表面特異性分子的表達進行分析；
所述S2具體包括即外泌體免疫步驟如下：
C57BL/6J小鼠尾靜脈注射外泌體5μg/只，于0天和20天各免疫一次；第二次免疫后20天C57BL/6J小鼠經腹腔注射1×106P.bANKA寄生的紅細胞pRBC；
外泌體聯合CpGODN免疫：C57BL/6J小鼠皮下注射外泌體10μg/只聯合CpG?ODN10μg/只，20天后再次外泌體單獨皮下注射5μg/只；第二次免疫后20天C57BL/6J小鼠經腹腔注射1×106P.bANKA寄生的紅細胞pRBC。
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