[發明專利]一種高羊茅組培快繁方法

有效

• 申請號: 202110399455.5
• 申請日: 2021-04-14
• 公開（公告）號: CN112970584B
• 公開（公告）日: 2021-12-10
• 發明（設計）人: 王茜;王志偉;王小利;陳瑩;吳家海;柳嘉佳
• 申請（專利權）人: 貴州省草業研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京東方盛凡知識產權代理事務所(普通合伙) 11562
• 代理人: 張雪

本發明公開了一種高羊茅組培快繁方法，包括：以高羊茅的幼嫩葉片為外植體，依次用乙醇和升汞消毒處理；消毒后的外植體接種愈傷組織誘導培養基誘導培養愈傷組織，室溫，光照培養25?30天；所得愈傷組織轉入分化培養基進行分化培養，室溫，光照培養25?30天；待培養的幼苗苗高達到3?5cm時，切下轉移到生根培養基，生根培養；室溫，光照培養25?30天；待根長出1?3條時，移除培養基，沖洗根部，移栽到含有珍珠巖的營養缽中，在室溫環境中繼續培養成苗。本發明以幼嫩葉片為外植體，通過生長周期內生長條件和培養基的優化，實現了生長周期縮短以及成活率提高的目的。

技術領域

本發明涉及植物組織培養技術領域，涉及一種高羊茅組培快繁方法。

背景技術

高羊茅(Festuca elata Keng ex E.Alexeev))是目前國內外廣泛應用的一種冷季型草坪草。草坪不僅具有美化環境、凈化空氣、調節小氣候、降低噪聲、保持水土等功能，還可以消除心里疲勞、放松心情、恢復體力的優點。而由于高羊茅喜寒冷潮濕，不耐高溫、對肥料敏感等特點，導致野生型高羊茅成活率和質量都比較低，因此，人們開始大量的栽培高羊茅，但是由于高羊茅的遺傳背景比較復雜，直接按照傳統草坪草的栽培方式進行栽培并不能得到高質量的高羊茅，不能滿足市場對其大批量的需求。隨著生物技術的快速發展，組織培養已經成為輔助農業生產的重要技術手段之一。

目前，人們由通過種子胚、幼苗下胚軸、成熟種子、花粉囊、幼穗等作為外植體誘導愈傷組織培養獲取再生植株，這些培養方式雖然能夠獲取再生植株，但是許多因素會影響到外植體的愈傷誘導和愈傷質量以及隨后的愈傷分化和再生，如外植體的選擇、培養基的選擇、附加成分的影響等。此外，由于高羊茅種子特別小，并且外面由穎殼包裹，直接破除穎殼獲取種子費工費時，并且很容易造成種子損傷，組培時還經常因附帶少量穎殼導致外植體消毒不徹底，誘導愈傷組織時容易造成培養基污染，嚴重影響組培成活率以及后續工作的順利進行。而幼苗下胚軸、花粉囊、幼穗等雖然不用破除穎殼，但是一方面這些外植體都是在高羊茅某一特定生長階段才能取材，受到生長期的制約，另一方面這些外植體雖然比種子大，但是相對而言仍然很小，取材相對不易，稍有疏忽可能損壞外植體；組培過程中從外植體選擇開始，任何一個環節的失誤可能導致組培失敗或者延長生育期。因此，受到取材、繁育時節以及組培條件等的影響，繁殖速度較慢并且質量參差不齊。而葉片作為高羊茅的營養器官，容易采集，并且生長周期的各個階段都存在，并且目前直接利用高羊茅幼嫩葉片作為外植體誘導愈傷組織還鮮有報道，因此，尋找一種新的高羊茅組培方法對于改善現存的技術問題極為重要。

發明內容

本發明的目的是提供一種高羊茅組培快繁方法，通過以幼嫩葉片為外植體，可以縮短生長周期以及提高成活率。

為實現上述目的，本發明提供了如下方案：

本發明提供了一種高羊茅組培快繁方法，包括以下步驟：

步驟1：以高羊茅的幼嫩葉片為外植體，依次用乙醇和升汞消毒處理；

步驟2：將步驟1消毒處理的外植體接種愈傷組織誘導培養基，誘導愈傷組織；培養條件為：室溫、光強2000-2500lx、每天光培養時長6-8h，培養25-30天；

步驟3：步驟2培養所得愈傷組織轉入分化培養基進行分化培養；培養條件為：室溫、光強2500-3000lx、每天光培養時長8-10h，培養25-30天；

步驟4：待步驟3培養的幼苗苗高達到3-5cm時，切下轉移到生根培養基，生根培養；培養條件為：25℃、光強2500-3000lx、每天光培養時長為10-12h，培養25-30天；

步驟5：待根長出1-3條時，移除培養基，沖洗根部，移栽到含有珍珠巖的營養缽中，在室溫環境中繼續培養成苗。