[發(fā)明專利]一種高羊茅組培快繁方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202110399455.5 | 申請日: | 2021-04-14 |
| 公開(公告)號: | CN112970584B | 公開(公告)日: | 2021-12-10 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 王茜;王志偉;王小利;陳瑩;吳家海;柳嘉佳 | 申請(專利權(quán))人: | 貴州省草業(yè)研究所 |
| 主分類號: | A01H4/00 | 分類號: | A01H4/00 |
| 代理公司: | 北京東方盛凡知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11562 | 代理人: | 張雪 |
| 地址: | 550006 貴州省貴*** | 國省代碼: | 貴州;52 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 高羊茅組培快繁 方法 | ||
1.一種高羊茅組培快繁方法,其特征在于,包括以下步驟:
步驟1:以高羊茅的幼嫩葉片為外植體,依次用乙醇和升汞消毒處理;
步驟2:將步驟1消毒處理的外植體接種愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基,誘導(dǎo)愈傷組織;培養(yǎng)條件為:室溫、光強(qiáng)2000-2500lx、每天光培養(yǎng)時長6-8h,培養(yǎng)25-30天;所述愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基以1/2MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基,并添加3-4mg/L2,4-D、0.5-1.5mg/L玉米素、0.1-0.2mg/LNAA、0.1-0.5mg/L蒜泥、20-25g/L蔗糖以及6-8g/L瓊脂,pH6.0-6.5;
步驟3:步驟2培養(yǎng)所得愈傷組織轉(zhuǎn)入分化培養(yǎng)基進(jìn)行分化培養(yǎng);培養(yǎng)條件為:室溫、光強(qiáng)2500-3000lx、每天光培養(yǎng)時長8-10h,培養(yǎng)25-30天;所述分化培養(yǎng)基以1/2MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基,并添加0.5-1.5mg/L玉米素、1-1.5mg/L KT、0.1-0.5mg/L活性炭、0.5-1mg/L蒜泥、20-25g/L蔗糖以及6-8g/L瓊脂,pH6.0-6.5;
步驟4:待步驟3培養(yǎng)的幼苗苗高達(dá)到3-5cm時,切下轉(zhuǎn)移到生根培養(yǎng)基,生根培養(yǎng);培養(yǎng)條件為:25℃、光強(qiáng)2500-3000lx、每天光培養(yǎng)時長為10-12h,培養(yǎng)25-30天;所述生根培養(yǎng)基以1/2MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基,并添加1-2mg/L活性炭、0.5-1mg/L蒜泥、10-12mg/LKH2PO4、20-25g/L蔗糖以及6-8g/L瓊脂,pH6.0-6.5;
步驟5:待根長出1-3條時,移除培養(yǎng)基,沖洗根部,移栽到含有珍珠巖的營養(yǎng)缽中,在室溫環(huán)境中繼續(xù)培養(yǎng)成苗;
步驟1中,將幼嫩葉片先用流水沖洗10-15min,再用75%乙醇消毒20-30s,無菌水沖洗3-5次,然后用0.1%升汞溶液消毒3-5min,無菌水沖洗3-5次,完成消毒處理;
步驟5中營養(yǎng)缽中還含有腐殖酸和草炭,所述珍珠巖:腐殖酸:草炭按質(zhì)量比3:3:2混合。
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