[發明專利]一種抗體藥物偶聯物的制備方法

有效

• 申請號: 202110390274.6
• 申請日: 2021-04-12
• 公開（公告）號: CN115192731B
• 公開（公告）日: 2023-09-26
• 發明（設計）人: 王文元;王召印;張琳
• 申請（專利權）人: 中國科學院上海有機化學研究所
• 主分類號: A61K47/68
• 分類號: A61K47/68;A61K45/06;A61K39/395;A61K49/00;A61P35/00;A61P35/02;C07K16/32
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司 31266
• 代理人: 馬莉華;徐迅

本發明公開了一種抗體藥物偶聯物的制備方法。具體地，該制備方法包括如下步驟：(a)提供一種包含兩個反應基團的突變抗體，其中，所述反應基團一個為游離巰基(?SH)，另一個為烴酰基芳基；(b)按任意先后順序，將所述突變抗體與帶有羥胺(?O?NH₂)基團或修飾有羥胺基團的藥物分子A和帶有馬來酰亞胺基團或修飾有馬來酰亞胺基團的藥物分子B反應，從而得到所述抗體藥物偶聯物。本發明的方法可以通過一鍋法高效制備耐藥性降低、藥效提高的抗體藥物偶聯物。

技術領域

本發明屬于生物醫學領域，具體涉及一種雙功能抗體藥物偶聯物的制備方法。

背景技術

惡性腫瘤是種高致死性疾病。傳統的癌癥治療方式包括外科手術，化學治療和物理治療，治療效果不太理想，腫瘤細胞容易產生耐藥性且一旦復發轉移其后果更為嚴重。靶向小分子藥物和單克隆抗體是近年來興起的腫瘤治療方式，但是治療病癥相對局限以及長期使用易出現耐藥現象而導致治療效果下降。腫瘤免疫治療是一種全身性治療方法，其原理是通過外界的條件性輔助，增強患者體內免疫系統對功能，從而達到殺傷腫瘤細胞，緩解病癥的目的。但是對于產生免疫耐受的腫瘤也常常收效甚微。由于當前任何一種療法單一使用都有一定的局限性。

抗體偶聯型藥物(antibody?drug?conjugates,ADCs)就是集化療藥物的高效毒性和抗體免疫治療的高度特異性而對病人進行高效低毒治療的一類新型藥物。ADCs是將具有抗腫瘤毒性的小分子抗癌藥物和具有靶向特異性的單克隆抗體利用連接子共價偶聯形成的復合藥。這種免疫偶聯物融合了小分子藥物(300-1000Da,IC₅₀在nmol以下)的高效抗腫瘤活性和單克隆抗體的高度選擇性，穩定性和良好的藥代動力特性。在選擇好合適靶點后，就需要制備對該靶點有良好親和力的抗體。但抗體150KD的分子量使ADCs很難透過毛細血管內皮層以及細胞外的間隙，導致其進入實體腫瘤部位的量遠小于給藥的劑量，因此早期的ADCs主要是針對血液瘤。為了使ADCs可以用于治療實體瘤，目前嘗試在保證抗體與抗原特異性結合的能力的前提下去除一些非必需的片段，降低ADCs的分子量，之后再與高效的小分子化合物偶聯，從而達到治療實體瘤的目的。至今為止，隨著臨床研究的不斷深入，ADCs在長期使用中也會漸漸出現了耐藥的狀況。

因此，腫瘤靶向治療領域需要提供新的用于耐藥性降低、藥效提高的治療藥物及其制備方法。

發明內容

本發明的目的是提供一種耐藥性降低、藥效提高的抗腫瘤藥物及其制備方法。

本發明第一方面，提供了一種抗體藥物偶聯物的制備方法，包括步驟：

(a)提供一種包含兩個反應基團的突變抗體，其中，所述反應基團一個為游離巰基(-SH)，另一個為烴酰基芳基

(b)按任意先后順序，將所述突變抗體與帶有羥胺(-O-NH₂)基團或修飾有羥胺基團的藥物分子A和帶有馬來酰亞胺基團或修飾有馬來酰亞胺基團的藥物分子B反應，從而得到所述抗體藥物偶聯物；

其中，當所述突變抗體與帶有羥胺基團或修飾有羥胺基團的藥物分子A反應時，反應溫度T1為37±10℃且pH為3-5；且

當所述突變抗體與帶有馬來酰亞胺基團或修飾有馬來酰亞胺基團的藥物分子B反應時，反應溫度T2為4±10℃且pH為5.1-6.5。

在另一優選例中，所述抗體選自下組：全長抗體、抗原結合片段、雙特異性抗體或納米抗體。