[發明專利]一種改造的酸性磷酸酶及其應用有效
| 申請號： | 202110388771.2 | 申請日： | 2021-04-12 |
| 公開（公告）號： | CN113088504B | 公開（公告）日： | 2022-10-11 |
| 發明（設計）人： | 劉立明;徐歆;宋偉;陳修來;劉佳;高聰 | 申請（專利權）人： | 江南大學 |
| 主分類號： | C12N9/16 | 分類號： | C12N9/16;C12N15/55;C12N15/70;C12N1/21;C12P17/04;C12R1/19 |
| 代理公司： | 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211 | 代理人： | 張勇 |
| 地址： | 214000 江蘇*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 改造 酸性磷酸酶 及其 應用 | ||
【權利要求書】：
1.酸性磷酸酶突變體，其特征在于，以氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的酸性磷酸酶為親本酶，將親本酶的第58位突變為苯丙氨酸；或
第94位突變為苯丙氨酸；或
第135位突變為精氨酸；或
第94位突變為苯丙氨酸、第135位突變為精氨酸；或
第58位突變為脯氨酸、第135位突變為精氨酸；或
第57位突變為組氨酸、第58位突變為脯氨酸、第135位突變為精氨酸。
2.編碼權利要求1所述突變體的基因。
3.攜帶權利要求2所述基因的重組質粒。
4.表達權利要求1所述突變體的微生物細胞。
5.攜帶權利要求3所述重組質粒的微生物細胞。
6.一種合成維生素C磷酸酯的方法，其特征在于，利用權利要求4或5所述微生物細胞以維生素C為底物，轉化生產維生素C磷酸酯。
7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，將權利要求4或5所述微生物細胞加入含有維生素C和焦磷酸鈉的反應體系，反應體系中的pH為3.8-4.3。
8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，在25-37℃下反應不少于8小時。
9.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，所述微生物細胞在反應體系中的濃度為20-40g/L，維生素C的濃度為70-100g/L，焦磷酸鈉的濃度為180-240g/L。
10.權利要求1所述突變體，或權利要求4或5所述微生物細胞在制備維生素C磷酸酯、含有維生素C磷酸酯的產品和維生素C磷酸酯衍生物中的應用。
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