[發明專利]篩選大豆材料的分子標記、篩選方法、育種方法和應用

有效

• 申請號: 202110388662.0
• 申請日: 2021-04-12
• 公開（公告）號: CN113046464B
• 公開（公告）日: 2021-10-22
• 發明（設計）人: 王嘉;楊文英;于曉波;梁建秋;曾召瓊;安建剛;馮軍;吳海英;張明榮
• 申請（專利權）人: 南充市農業科學院
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 成都為知盾專利代理事務所(特殊普通合伙) 51267
• 代理人: 楊宜付

本發明公開一種篩選大豆材料的分子標記、篩選方法、育種方法和應用，所述分子標記包括InDel標記或/和dCAPS標記，利用前述分子標記篩選大豆高蛋白材料的步驟包括：選擇所述InDel標記作為引物對；利用所述InDel標記的引物對，選擇一個或多個大豆品種DNA進行第一PCR擴增；將所述第一PCR擴增產物進行第一電泳檢測，第一電泳檢測條帶以高帶呈現的大豆品種為低蛋白品種，第一電泳檢測條帶以低帶呈現的大豆品種為高蛋白品種。本發明基于全基因組重測序和QTL定位技術，開發靶向明確的高蛋白InDel和dCAPS，通過InDel和dCAPS組合標記的形式為今后大豆高蛋白質資源的篩選和分子標記輔助選育高蛋白、農藝和品質性狀優良的育種材料或品種提供新方式。

技術領域

本發明屬于作物遺傳育種領域，涉及篩選大豆高蛋白材料的分子標記，以及使用該引物篩選大豆高蛋白材料的方法，以及利用所述引物篩選目標株系進行育種的方法。

背景技術

大豆籽粒富含蛋白質，占籽粒干物質的31％～55％，是人類食物蛋白的主要來源之一。其蛋白質產量占生產蛋白作物蛋白質產量的三分之二，更為難得的是它富含多種人體必需氨基酸，世界衛生組織將大豆蛋白質定為一類蛋白。同時，大豆蛋白具有很好的功能特性，能夠運用在多種食品體系，提高產品質量。

目前，在大豆所有20個染色體上均發現有蛋白相關的QTL位點，其中利用連鎖分析共檢測到213個蛋白質含量QTL，利用關聯分析共檢測到85個蛋白質含量QTL。這些QTL貢獻率介于0.002％～80％之間。但是，大豆蛋白含量是多基因控制的數量性狀,蛋白相關QTL具有材料特異性，不能通用于特定育種群體的分子標記輔助選擇育種。

大豆蛋白含量是典型的多基因控制的數量性狀,且蛋白相關QTL具有材料特異性，不能通用于特定育種群體的分子標記輔助選擇育種。其次，大豆的品種資源豐富，遺傳特性復雜，與整個基因組相比功能性標記較少。

在實現本發明過程中，發明人發現現有技術中至少存在如下問題：

目前開發的分子標記多基于連鎖分析，不能直接靶向目標基因，基因的分離重組會造成標記信息的丟失，對目標性狀的選擇造成一定的困難。

發明內容

鑒于此，本發明目的在于提供一種標記特異性高分子標記，包括InDel標記和/或dCAPS標記。

本發明的另一目的是提供一種利用本發明提供的InDel標記和dCAPS標記篩選高蛋白大豆材料的方法。

本發明的第三個目的是利用InDel標記和dCAPS標記引物組合篩選大豆繁殖材料進行大豆育種的方法。

本發明的第四個目的是提供一種InDel標記和dCAPS標記引物組合篩選大豆繁殖材料上的應用。

發明人通過長期的探索和嘗試，以及多次的實驗和努力，不斷的改革創新，為解決以上技術問題，本發明提供的技術方案是，提供一種篩選大豆高蛋白材料的分子標記，所述分子標記包括InDel標記、dCAPS標記中的一個或兩個；

所述InDel標記的引物對堿基序列如下：

NC_SAM-InDelF：AAGCCTTTTGAGTTGTGGA；

NC_SAM-InDelR：ATTGCTATTTCCCTTCTGC；

所述dCAPS標記的引物對堿基序列如下：

NC_BET12dCAPSF：ATGTAGAAGCAGGAGCAGAAGAGGGGGATC；

NC_BET12dCAPSR：TAAAGAAGAACTGCTGGAA。

本發明還提供了一種利用前述分子標記篩選大豆高蛋白材料的方法，包括如下步驟：

S1.1選擇所述InDel標記作為引物對；