[發明專利]一種MALDI-TOF質譜平臺檢測麻醉藥物和鎮痛藥物用藥相關的基因位點的試劑盒

在審

• 申請號: 202110385128.4
• 申請日: 2021-04-09
• 公開（公告）號: CN113088570A
• 公開（公告）日: 2021-07-09
• 發明（設計）人: 崔旭蕾;傅衛軍;徐波;費昱達;譚剛;朱安娜;劉啟祥;陳瓊
• 申請（專利權）人: 廣州市達瑞生物技術股份有限公司;中國醫學科學院北京協和醫院
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 段卉

本發明公開了一種MALDI?TOF質譜平臺檢測麻醉藥物和鎮痛藥物用藥相關的基因位點的試劑盒，其無需添加其它標記，僅需合成普通引物，檢測成本低，適合大規模人群分子篩查和常規基因診斷；反應體系為非雜交依賴性，不存在潛在的雜交錯配干擾，具有良好的準確性；檢測通量大；只需最低2ng的DNA樣本，就能進行分型，分析靈敏度高；具有極高的精確度和極快的速度，人力成本與檢測成本低，適合大規模人群分子篩查和常規基因診斷。本發明實現了在同一試劑盒中檢測麻醉藥物及鎮痛藥物用藥相關(惡性高熱)的60基因位點，能有效解決因遺傳多態性造成醉藥物效果差異甚至致死等問題，可幫助醫生調整麻醉方案，以取得高效、安全、經濟的最佳治療效果。

技術領域

本發明涉及基因檢測技術領域，具體地，涉及一種MALDI-TOF質譜平臺檢測麻醉藥物和鎮痛藥物用藥相關的基因位點的試劑盒。

背景技術

麻醉是指用藥物或非藥物方法使機體或機體一部分暫時失去感覺，以達到無痛的目的，多用于手術或某些疾病的治療。麻醉用藥一般分為麻醉藥物和麻醉輔助藥物兩大類，其中麻醉藥物被國家高度監管。麻醉藥物通常兼具鎮靜、鎮痛、肌松等多種功能，如七氟烷、丙泊酚等；麻醉輔助藥物常常只具有某一方面功效，如鎮靜催眠、麻醉鎮痛、肌松、拮抗、降壓、止嘔等。現代麻醉學開始于1846年，在麻醉藥物的臨床應用中，不同病人使用同一劑量的麻醉藥物時，意識消失的時間、蘇醒時間、麻醉深度、用藥的發生率存在較大的個體差異。多年的研究發現，遺傳因素是造成個體間藥代動力學、藥效學反應差異的重要原因。麻醉藥物基因組學研究能夠為麻醉藥物的個體化用藥和預防用藥提供重要依據，準確預測病人對麻醉藥物的反應，提高手術麻醉的安全性?；A研究提高了麻醉學專業性，實現臨床和基礎的相互轉化，更好實現個體用藥，實現麻醉藥應用的安全和有效。

惡性高熱(Malignant hyperthermia，簡稱MH)是一種嚴重的骨骼肌肉代謝亢進綜合征，其為常染色體顯性遺傳性疾病。臨床上揮發性吸入麻醉劑、去極化肌松藥的使用及其他刺激(熱、壓力)均可能誘發惡性高熱的發生。惡性高熱易感者的骨骼肌細胞膜發育缺陷，在誘發藥物作用下，使肌細胞漿內鈣離子濃度迅速增高，使肌肉攣縮，產熱急劇增加，體溫迅速升高，同時產生大量乳酸和二氧化碳，出現酸中毒、低氧血癥、高血鉀、心律失常等一系列變化，嚴重者可致患者死亡。其發病過程兇險，在沒有特效藥物的情況下，病死率可高達70％以上，但是其特效藥物丹曲林鈉目前尚未在我國正式上市。惡性高熱的診斷，對指導麻醉用藥和早期確診惡性高熱具有重要的臨床意義。

藥物基因組學從基因水平闡述了基因多態性與藥物效應的關系，進一步指導臨床個體化給藥。臨床實踐發現麻醉藥物適用存在個體差異，隨著人類基因組計劃等基因研究深度的逐漸增加，一些基因位點的多態性已被發現與鎮痛、鎮靜和肌松等麻醉效應相關，遺傳多態性是造成個體對藥物反應差異的重要因素之一。通過分析麻醉和鎮痛藥物相關的基因位點，能夠幫助醫生預測病人對麻醉及鎮痛藥物的反應，并根據病人的不同基因組學特性合理用藥，達到提高藥效，降低毒性，避免不良反應。

發明內容

本發明的目的是為了克服現有技術的上述不足，提供一組MALDI-TOF質譜平臺檢測麻醉藥物和鎮痛藥物用藥相關的基因位點的多重PCR擴增引物及單堿基延伸引物。本發明檢測的對象包括了麻醉藥物及鎮痛藥物(惡性高熱)等方面相關的60個基因位點的基因型。其建立的檢測試劑盒靈活性與可擴展性兼備，操作簡單且高通量自動化，高通量且低成本，能有效解決因遺傳多態性造成醉藥物及鎮痛藥物效果差異甚至致死等問題，可幫助醫生調整用藥方案，以取得高效、安全、經濟的最佳治療效果。

本發明的第一個目的是提供一組MALDI-TOF質譜平臺檢測麻醉藥物和/或鎮痛藥物用藥相關的基因位點的多重PCR擴增引物。

本發明的第二個目的是提供一組MALDI-TOF質譜平臺檢測麻醉藥物和/或鎮痛藥物用藥相關的基因位點的單堿基延伸引物。

本發明的第三個目的是提供所述的多重PCR擴增引物中的一條或幾條，和/或所述的單堿基延伸引物中的一條或幾條在制備檢測麻醉藥物和/或鎮痛藥物用藥相關的基因位點的基因型的試劑盒中的應用。