[發(fā)明專利]一種負(fù)壓平衡離心制片方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110384046.8
• 申請(qǐng)日: 2021-04-09
• 公開（公告）號(hào): CN113109124B
• 公開（公告）日: 2022-04-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 朱思龍
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 興宏業(yè)（武漢）科技有限公司
• 主分類號(hào): G01N1/38
• 分類號(hào): G01N1/38;G01N1/28
• 代理公司: 武漢瀛卓知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 42255
• 代理人: 朱詩恩;張靜

本發(fā)明提供了一種負(fù)壓平衡離心制片方法，包括如下步驟：S1，制作涂覆有粘附劑的載玻片，并安裝于玻片架上；S2，將制片倉安裝在玻片架上并壓緊載玻片，將裝有處理液、細(xì)胞標(biāo)本液的混合液的離心瓶安裝在制片倉的另一端上形成離心套件；S3，將離心套件安裝在離心機(jī)上，啟動(dòng)離心機(jī)；S4，將離心機(jī)轉(zhuǎn)速提升至轉(zhuǎn)速N2維持一段時(shí)間，其中轉(zhuǎn)速N2產(chǎn)生的離心力使得離心瓶?jī)?nèi)的混合液經(jīng)所述細(xì)小開口甩出至制片倉中并流向載玻片，直到制片倉中的混合液至少淹沒過所述細(xì)小開口。本發(fā)明采用離心機(jī)多次低速、高速循環(huán)轉(zhuǎn)動(dòng)的方法即可有效地完成細(xì)胞標(biāo)本液的比重分離、細(xì)胞濃集以及制片的過程。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及細(xì)胞制片技術(shù)領(lǐng)域，具體地涉及一種負(fù)壓平衡離心制片方法。

背景技術(shù)

目前，公知的脫落細(xì)胞制片方法往往需要先將細(xì)胞標(biāo)本液進(jìn)行比重分離以離心分離出雜質(zhì)，然后進(jìn)一步對(duì)細(xì)胞標(biāo)本液進(jìn)行細(xì)胞濃集離心以收集細(xì)胞沉渣，再利用少量的細(xì)胞處理液使細(xì)胞沉渣形成細(xì)胞懸濁液，最后將高濃度的細(xì)胞懸濁液加入到制片倉中進(jìn)行制片，這樣的制片方法步驟繁多，制片時(shí)間長(zhǎng)，工作量大，效率低，且細(xì)胞標(biāo)本液必須進(jìn)行多次轉(zhuǎn)移，在轉(zhuǎn)移的過程中，容易丟失細(xì)胞，從而降低了檢出率。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明旨在至少解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的技術(shù)問題之一。為此，本發(fā)明提出一種負(fù)壓平衡離心制片方法，包括如下步驟：

S1，制作涂覆有粘附劑的載玻片，并安裝于玻片架上；

S2，將制片倉安裝在玻片架上并壓緊載玻片，將裝有處理液、細(xì)胞標(biāo)本液的混合液的離心瓶安裝在制片倉的另一端上形成離心套件，并使制片倉內(nèi)腔與大氣保持通暢，其中離心瓶的一端具有細(xì)小開口其余部分密封，所述細(xì)小開口朝向載玻片并與載玻片之間保持一定距離；

S3，將離心套件安裝在離心機(jī)上，啟動(dòng)離心機(jī)；

S4，將離心機(jī)轉(zhuǎn)速提升至轉(zhuǎn)速N₂，維持轉(zhuǎn)速N₂一段時(shí)間，其中轉(zhuǎn)速N₂產(chǎn)生的離心力使得離心瓶?jī)?nèi)的混合液經(jīng)所述細(xì)小開口甩出至制片倉中并流向載玻片，直到制片倉中的混合液至少淹沒過所述細(xì)小開口。

進(jìn)一步地，還包括以下步驟：

S5、離心機(jī)轉(zhuǎn)速增加至轉(zhuǎn)速N₁并維持一段時(shí)間。

進(jìn)一步地，還包括以下步驟：

S6，將離心機(jī)的轉(zhuǎn)速逐漸降低到轉(zhuǎn)速N₂并維持一段時(shí)間，使得制片倉中淹沒過所述細(xì)小開口的混合液被吸回離心瓶?jī)?nèi)；

S7，重復(fù)S5、S6步驟直至使足夠數(shù)量的細(xì)胞附著于載玻片上。

進(jìn)一步地，所述細(xì)小開口與載玻片之間的距離為0.5-15mm。

進(jìn)一步地，所述細(xì)小開口的內(nèi)徑為1-3mm。

進(jìn)一步地，所述離心瓶包括離心瓶本體，所述離心瓶本體與所述細(xì)小開口之間通過細(xì)管相連。

進(jìn)一步地，所述細(xì)管與所述離心瓶本體之間通過錐形體相連。

進(jìn)一步地，所述轉(zhuǎn)速N₁范圍為200-1000轉(zhuǎn)/分鐘，所述轉(zhuǎn)速N₂范圍為100-900轉(zhuǎn)/分鐘。

本發(fā)明所提供的負(fù)壓平衡離心制片方法，離心機(jī)多次低速、高速循環(huán)轉(zhuǎn)動(dòng)的方法即可有效地完成細(xì)胞標(biāo)本液的比重分離、細(xì)胞濃集以及制片的過程，本發(fā)明所提供的制片方法無需多次轉(zhuǎn)移細(xì)胞標(biāo)本液，進(jìn)而有效地避免了細(xì)胞標(biāo)本液轉(zhuǎn)移過程中出現(xiàn)的細(xì)胞丟失的問題，從而確保了檢出的準(zhǔn)確性，制片時(shí)間短，極大地節(jié)約了時(shí)間，減小了工作量，制片效率高。

附圖說明

圖1是本發(fā)明使用的一種負(fù)壓平衡離心瓶的結(jié)構(gòu)示意圖；

圖2是本發(fā)明使用的另一種負(fù)壓平衡離心瓶的結(jié)構(gòu)示意圖；